Question

【題目】槲皮素是一種天然的黃酮類化合物，在我國資源十分豐富，科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)單純使用槲皮素治療癌癥，雖有一定的療效，但癌細(xì)胞的絕對數(shù)量仍在增加。若用于臨床治療，最好同時(shí)配合對細(xì)胞殺傷能力較強(qiáng)的化療或放療。現(xiàn)欲研究槲皮素濃度對X射線照射誘導(dǎo)的人宮頸癌細(xì)胞凋亡的影響，請根據(jù)以下材料和用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)思路，并進(jìn)行分析與討論。

材料與用具：已知濃度的人宮頸癌細(xì)胞懸液，用完全培養(yǎng)基配制的濃度為60、90、120、150μmol/L的槲皮素溶液，完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶，CO2培養(yǎng)箱等。

（說明：不考慮加入溶液對體積的影響，X射線處理10d后測平均致死劑量（醫(yī)學(xué)上指可殺死63%細(xì)胞的照射劑量）和細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)（常用臨床劑量下），兩個(gè)指標(biāo)的具體檢測過程不作要求）

請回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①將已知濃度的人宮頸癌細(xì)胞懸液均分為5組，分別放入培養(yǎng)瓶中，編號為A、B、C、D、E；

②在A組中加入適量_________________，依次在B～E組中分別加入等量濃度為60、90、120、150 μmol/L的槲皮素溶液；

③一段時(shí)間后，用________________________________處理各組人宮頸癌細(xì)胞；

④將各組培養(yǎng)瓶置于___________________培養(yǎng)10d后，測定各組平均致死劑量和細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)；

⑤統(tǒng)計(jì)、分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

組別	槲皮素濃度（μmol/L）	平均致死照射劑量（GY）	細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)（%）
A	0	1． 91	59． 7
B	60	1． 40	56． 8
C	90	1． 18	54． 9
D	120	1． 04	46． 2
E	150	0． 96	27． 2

請用柱形圖形式表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果：_____________________________________

（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)論：_____________________________________________________。

（4）分析與討論：

①其后的研究發(fā)現(xiàn)，若各組都沒有用X射線照射，10d后各組癌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯差別。但在更長一段時(shí)間后，各組的癌細(xì)胞絕對數(shù)量雖然仍在增加，但已經(jīng)有了明顯差別，槲皮素濃度越大的組，宮頸癌細(xì)胞數(shù)目越少。槲皮素抑制宮頸癌細(xì)胞數(shù)目增長的途徑可能是________________和__________________。

②借助血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，若1個(gè)____________(大或中或小)方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)目多于300個(gè)或數(shù)不過來，可用稀釋的方法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

Answer 1

【答案】完全培養(yǎng)基 （不同劑量）X射線 CO2培養(yǎng)箱 槲皮素可以促進(jìn)X射線照射誘導(dǎo)的人宮頸癌細(xì)胞凋亡；且隨槲皮素濃度的增加，促進(jìn)作用增強(qiáng) 抑制細(xì)胞分裂 促進(jìn)細(xì)胞凋亡 中

【解析】

根據(jù)題意可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是：研究槲皮素濃度對X射線照射誘導(dǎo)的人宮頸癌細(xì)胞凋亡的影響，因此實(shí)驗(yàn)的自變量是槲皮素濃度濃度的不同和不同劑量的X射線，因變量是平均致死劑量和細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)，其他均為無關(guān)變量，無關(guān)變量保持相同且適宜。

（1）根據(jù)以上分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是：研究槲皮素濃度對X射線照射誘導(dǎo)的人宮頸癌細(xì)胞凋亡的影響，因此實(shí)驗(yàn)的自變量是槲皮素濃度濃度的不同，因變量是平均致死劑量和細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)。實(shí)驗(yàn)在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞需要完全培養(yǎng)液和培養(yǎng)過程中需要一定的氣體，實(shí)驗(yàn)思路如下：

①將已知濃度的人宮頸癌細(xì)胞懸液均分為5組，分別放入培養(yǎng)瓶中，編號為A、B、C、D、E；

②在A組中加入適量完全培養(yǎng)基或者完全培養(yǎng)液，依次在B～E組中分別加入等量濃度為60、90、120、150 μmol/L的槲皮素溶液；

③一段時(shí)間后，用不同劑量的X射線照射處理各組人宮頸癌細(xì)胞；

④將各組培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)10d后，測定各組平均致死劑量和細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)；

⑤統(tǒng)計(jì)、分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

（2）根據(jù)表中數(shù)據(jù)分析，則柱狀圖如下：

（3）分析表中實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，與對照組相比，隨著槲皮素濃度的增大，細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)降低，而且實(shí)驗(yàn)組各組X射線照射平均致死劑量減小，說明槲皮素可以促進(jìn)X射線照射誘導(dǎo)的人宮頸癌細(xì)胞凋亡；且隨槲皮素濃度的增加，促進(jìn)作用增強(qiáng)。

（4）分析與討論：

①根據(jù)題意可知，若各組都沒有用X射線照射，10d后各組癌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯差別。但在更長一段時(shí)間后，各組的癌細(xì)胞絕對數(shù)量雖然仍在增加，但已經(jīng)有了明顯差別，槲皮素濃度越大的組，宮頸癌細(xì)胞數(shù)目越少。說明隨著時(shí)間增長，槲皮素通過抑制細(xì)胞分裂達(dá)到抑制宮頸癌細(xì)胞數(shù)目增長，或者通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡使得宮頸癌細(xì)胞數(shù)目減少。

②使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，若1個(gè)方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)目多于300個(gè)或數(shù)不過來，根據(jù)數(shù)量多于300可以看出統(tǒng)計(jì)的是1個(gè)中方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目，因此可用稀釋的方法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。