Question

【題目】血管內皮生長因子（VEGF）是目前發(fā)現的誘導腫瘤血管生成的最強烈的血鋅生成因子，針對VEGF生產的抗腫瘤藥物，是治療癌癥的一個方向；芝加哥大學的Katherine Knight博士成功地在轉基因兔中獲得骨髄瘤樣腫瘤，經技術改進，能高產量地生產兔單克隆抗體：我國江蘇省某公司首次在全球成功開發(fā)出人源化兔單抗藥物“注射用人源化抗VEGF單克隆抗體”（SIM63）,有效打破了跨國公司的技術壟斷。人源化抗體可以大大減少異源抗體對人類機體造成的免疫副反應。請回答下列相關問題：

（1）動物細胞在體外培養(yǎng)的技術屬于 工程，由于人們對動物細胞所需的營養(yǎng)物質沒有完全搞淸楚，在使用合成培養(yǎng)基時，通常需要加入 等一些天然成分：在培養(yǎng)時除提供細胞所需的O2外，還需要CO2，其作用是 。

（2）在基因工程中，將目的基因導入動物細胞現今極常用、極有效的方法是 ，要在短時間內擴增大量的目的基因采用 技術，這個技術中的關鍵酶是 。

（3）當VEGF作為抗原進入動物體內時，動物體內的某些B細胞分化為漿細胞，這種漿細胞只分泌針對VEGF的一種抗體，但B細胞在體外培養(yǎng)不會無限增殖，解決這一問題的方法是通過動物細胞融合技術得到雜交瘤細胞，常用的化學誘導融合試劑為 ，要分離出雜交瘤細胞,應該用 培養(yǎng)基進行篩選，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是它的 ,并可大量制備。

Answer 1

【答案】

（1）動物細胞（1分） 血清（或血漿） 維持培養(yǎng)液的PH

（2）顯微注射 PCR（多聚酶鏈式反應）（1分） Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）

（3）聚乙二醇（PEG） 選擇（1分） 特異性強、靈敏度高

【解析】

（1）動物細胞在體外培養(yǎng)的技術屬于動物細胞工程，由于人們對細胞所需的營養(yǎng)物質還沒有完全搞清楚，故在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等天然成分；氣體環(huán)境主要是提供細胞所需的O2和CO2，其中O2的作用是提供細胞進行有氧呼吸，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（2）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。要在短時間內擴增大量的目的基因采用PCR技術，這個技術需要高溫使得DNA分子解旋，因此相關酶具有耐熱型，該技術用了關鍵酶為Taq酶。

（3）效應B細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞，誘導細胞融合的方法有化學法（聚乙二醇）、滅活的病毒（如仙臺病毒、滅活病毒）、和物理方法（電激、振動和離心）。通過選擇培養(yǎng)基可以對雜交瘤細胞進行篩選，單克隆抗體其特點是特異性強、靈敏度高。