Question

15．為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過(guò)的土壤進(jìn)行如圖A所示的實(shí)驗(yàn)．

（1）配制好的培養(yǎng)基滅菌通�？梢允褂酶邏赫羝麥缇�法．步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是石油是唯一碳源．
（2）同學(xué)甲進(jìn)行過(guò)程④的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；推測(cè)同學(xué)甲用此方法接種時(shí)出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是涂布不均勻；在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了過(guò)程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57．據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為5.7×10⁷．
（4）步驟⑤需要震蕩培養(yǎng)其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率．
（5）步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、分析圖B：圖B采用的是稀釋涂布平板法，但涂布不均勻．

解答 解：（1）培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌．該實(shí)驗(yàn)的目的是為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，因此步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是石油是唯一碳源．
（2）圖B采用的接種方法是稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是涂布不均勻．
（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了步驟④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接人0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57．據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×10⁷個(gè)．
（4）步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是提高培養(yǎng)液中（溶解）氧的含量，通過(guò)振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率．
（5）步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強(qiáng)的細(xì)菌．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌      石油是唯一碳源
（2）稀釋涂布平板法     涂布不均勻    檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格
（3）5.7×10⁷
（4）菌體與培養(yǎng)液充分接觸
（5）篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記無(wú)菌技術(shù)；掌握稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)的相關(guān)計(jì)算，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．