Question

【題目】在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以發(fā)熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究巾有著廣泛的應用。請回答下列問題：

(1)熒光素酶基因可以人工合成，也可以從_____中獲取。利用PCR技術擴增熒光素酶基因是利用___的原理。

(2)限制酶是切割DNA的工具酶，下圖為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點。若需利用酶切法（只用一種酶）獲得熒光素酶基因，最應選擇的限制酶是______

(3)熒光素酶基因常被作為基因工程中的標記基因，其作用是________， 熒光素酶基因也可以作為將為目的基因轉入某些動植物細胞中表達產生熒光素酶。將目的基因導入植物細胞的技術中，最常用的是____。

(4)下列關于質粒運載體的說法正確的是________（多選）。

A．沒有限制酶就無法使用質粒運載體

B．質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C．質粒運載體可能是從細菌或者病毒的DNA改造的

D．質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則

E．質粒運載體只有把目的基因整合到受體細胞的DNA中才能表達

(5)將目的基因導入植物細胞，目前常用的目的基因載體是Ti質粒，目的基因需插入到該基因載體的______上。將導入熒光素酶基因的植物細胞，可經過___形成轉基因植株。

Answer 1

【答案】 基因文庫 PCR MSP1 篩選出含有目的基因的細胞 農桿菌轉化法 ACD T-DNA 植物組織培養(yǎng)

【解析】試題分析：分析圖表：含有目的基因的外源DNA分子中含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、MboⅠ和MspⅠ的識別序列和切割位點，其中BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，SmaⅠ的酶切位點只有一個，SmaⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割。

（1）熒光素酶基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲取。PCR技術的原理是DNA復制。
（2）要獲得目的基因必須在目的基因的兩側相應的酶切位點進行切割，圖1中可以看出，BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，故不可取；SmaⅠ的酶切位點只有一個，故不可取；根據表格可以看出，SmaⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割。

（4）質粒作為運載體，必須先用同種限制酶切割，才能與目的基因整合重組，A正確；質粒運載體與目的基因沒有成功重組也會被導入受體細胞，B錯誤；質粒運載體可來自細菌，病毒的DNA改造，C正確；質粒的本質是小型環(huán)狀DNA，其復制和表達遵循中心法則，可獨立的在受體細胞表達，D正確，E錯誤。

（3）標記基因的作用是將含有目的基因的細胞篩選出來。將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法。

（5）農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。將轉基因受體細胞培育成轉基因植株常用植物組織培養(yǎng)技術。