Question

【題目】某些微生物能表達(dá)黃曲霉毒素B1（AFB1）解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB1解毒酶的流程圖。

據(jù)圖回答問(wèn)題：

(1)過(guò)程I需要選擇含解毒酶的菌液中的細(xì)胞提取總RNA，理由是____________。

(2)過(guò)程Ⅱ中，需要用引物的原因是____________________________。

(3)構(gòu)建酵母工程菌最常用的運(yùn)載工具是____________，操作程序中關(guān)鍵環(huán)節(jié)是________，檢測(cè)酵母工程菌中AFB1解毒酶基因是否轉(zhuǎn)錄，應(yīng)采用____________方法。

(4)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的____________，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的________________。

Answer 1

【答案】 菌液中含解毒酶，意味著細(xì)胞中解毒酶基因的正常（完成了）表達(dá) DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，而只能從3’端延伸DNA鏈 質(zhì)粒 構(gòu)建基因表達(dá)載體 分子雜交 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 脫氧核苷酸序列

【解析】試題分析：圖示為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB1解毒酶的流程圖，先用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，進(jìn)而導(dǎo)入酵母菌、表達(dá)純化獲得AFB1解毒酶。

（1）由于菌液中含解毒酶，意味著細(xì)胞中解毒酶基因的正常（完成了）表達(dá)，所以過(guò)程l應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA。

（2）由于DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，而只能從3’端延伸DNA鏈，因此過(guò)程Ⅱ中，需要用引物。

（3）構(gòu)建酵母工程菌時(shí)，常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，關(guān)鍵步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體；轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是mRNA，可以利用分子雜交法進(jìn)行檢測(cè)。

（4）蛋白質(zhì)工程的本質(zhì)是通過(guò)基因改造或基因合成，所以設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，從而提高酶的活性。