Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：

（１）限制性內(nèi)切酶切割ＤＮＡ分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有 和 。

（２）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：

為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是 。

（３）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即 DNA連接酶和 DNA連接酶。

（４）反轉(zhuǎn)錄作用的模板是 ，產(chǎn)物是 。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用 技術(shù)。

（５）基因工程中除質(zhì)粒外， 和 也可作為運(yùn)載體。

（６）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是 。

Answer 1

【答案】（1）平末端（1分) 粘性末端 (1分)

（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同 (2分)

（3）T４ (1分) Ecoli (1分)

（4）mRNA (2分) 單鏈DNA (2分) PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）(1分)

（5）動(dòng)植物病毒 (1分) λ噬菌體的衍生物 (1分)

（6）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱 (2分)

【解析】

試題分析：（1）限制性內(nèi)切酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切割DNA分子后產(chǎn)生的是平末端，而在在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切割后產(chǎn)生的是黏性末端。

（2）若用不同的限制酶切割運(yùn)載體與含有目的基因的DNA片段，只有切割后運(yùn)載體與目的基因產(chǎn)生的黏性末端相同，才能使運(yùn)載體與目的基因相連。因此質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后，為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同的另一種限制性內(nèi)切酶切割。

（3）根據(jù)酶的來源不同，DNA連接酶分為兩類: 一類是從T４噬菌體中分離出來的，稱為T４DNA連接酶，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coli DNA連接酶。

（4）反轉(zhuǎn)錄是以mRNA為模板來合成DNA的過程，因此反轉(zhuǎn)錄作用的模板是mRNA，產(chǎn)物是單鏈DNA。可以在體外短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)，所以若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)。

（5）基因工程中的運(yùn)載體除質(zhì)粒外,還有動(dòng)植物病毒、λ噬菌體的衍生物等。

（6）大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入,導(dǎo)致未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱 ，所以一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。