Question

17．如圖為單克隆抗體制備流程示意圖．

（1）單克隆抗體制備技術的基礎是動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合．
（2）細胞融合是隨機的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選雜交瘤細胞．在細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的種類和數(shù)量（濃度），以保證生命活動的正常進行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/mL，每孔滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點是靈敏度高、特異性強．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細胞，放射性物質(zhì)在細胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細胞膜．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為單克隆抗體的制備過程．首先給小鼠注射特定的抗原，篩選出產(chǎn)生抗體的淋巴細胞；將能產(chǎn)生抗體的淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，篩選出雜交瘤細胞；最后再篩選出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞．

解答 解：（1）單克隆抗體的制備涉及的技術有動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)．
（2）由圖可知，骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基上無法生長，所以骨髓瘤細胞自身融合的細胞也不能在該培養(yǎng)基上存活；淋巴細胞和淋巴細胞自身融合的細胞能在HAT培養(yǎng)基上正常生活，但不能增殖．所以，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選出雜交瘤細胞．在細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的種類和數(shù)量（濃度），以保證生命活動的正常進行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/mL，每孔滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細胞，單克隆抗體是分泌蛋白質(zhì)，首先在核糖體中合成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上初步加工，之后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)邊緣以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，轉(zhuǎn)移到高爾基體上，與高爾基體膜融合，囊泡中的物質(zhì)也進入到高爾基體中，在高爾基體中進一步加工成成熟的蛋白質(zhì)，高爾基體膜也突起形成小泡，小泡離開高爾基體，轉(zhuǎn)移到細胞膜上，小泡中物質(zhì)釋放到細胞膜外．因此，放射性物質(zhì)在細胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是：核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細胞膜．
故答案為：
（1）動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合
（2）篩選雜交瘤細胞 　種類和數(shù)量（濃度）
（3）使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（4）靈敏度高、特異性強     
（5）核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細胞膜

點評 本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備，要求考生識記單克隆抗體制備的原理及過程，能結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．