Question

香蕉原產(chǎn)熱帶地區(qū)，是我國南方重要的經(jīng)濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV，單鏈環(huán)狀DNA病毒）

引起的香蕉束頂病，對香蕉生產(chǎn)的危害十分嚴(yán)重。當(dāng)前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質(zhì)水平，具有重要意義。請根據(jù)上述材料，回答下列問題：

（1）簡述香蕉大規(guī)�？焖俜敝臣夹g(shù)的過程。

（2）脫毒香蕉苗的獲得，可采用                  ＿的方法，此方法的依據(jù)

是                  ＿和                    ＿。

（3）建立可靠的BBTV檢測方法可以監(jiān)控脫毒香蕉苗的質(zhì)量，請問可用哪些方法

    檢測病毒的存在？（列舉兩種方法）

（4）在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因帥對提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價值，設(shè)想通過基因工程技術(shù)，采用重組的Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)移一段DNA進入細(xì)胞并且整合到染色體上，以促進抗凍蛋白基因在香蕉細(xì)胞中的表達(dá)，提高香蕉抗寒能力。右圖是一個已插入外源DNA片段的重組Ti質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)模式圖，請?zhí)畛鰳?biāo)號所示結(jié)構(gòu)的名

稱：①          ②          ③            。

在運用轉(zhuǎn)基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會出現(xiàn)什么問題？（列舉兩點）

（6）抑制果膠裂解酶的活性可以延長香蕉果實儲藏期，請描述采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)降低該酶活性的一般過程。

Answer 1

（1）選取香蕉外植體，通過誘導(dǎo)脫分化產(chǎn)生愈傷組織，然后通過調(diào)整植物激素比

        例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導(dǎo)大量形成胚狀體，制成

        人工種子，適宜條件下萌發(fā)長成幼苗）（2分）。

（2）莖尖（分生組織）組織培養(yǎng)；莖尖不帶病毒（或病毒在植物體內(nèi)分布不均

        勻）；植物細(xì)胞全能性。

（3）①BBTV病毒基因的檢測（DNA分子雜交技術(shù)）；②BBTV病毒蛋白的檢測

        （獲得抗血清，利用抗原一抗體的雜交反應(yīng)，判斷病毒是否存在）。

（4）①T-DNA     ②標(biāo)記基因    ③復(fù)制原點

生態(tài)安全問題包括：①外源基因擴散到其他物種（外源基因漂移）；②轉(zhuǎn)基因

        植株擴散影響生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能；③轉(zhuǎn)基因植株擴散對生物多樣性的影

        響；④轉(zhuǎn)基因植物殘體或分泌物對環(huán)境的影響。

   （5）蛋白質(zhì)工程方法的步驟為：①果膠裂解酶蛋白的功能分析，②果膠裂解酶蛋白

        的結(jié)構(gòu)預(yù)測和設(shè)計，③果膠裂解酶基因的改造。