2.在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析。PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題:
(1)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出引物Ⅱ,并在復(fù)性這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。
(2)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。
(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點(diǎn):__________,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_(kāi)_________。
(4)PCR反應(yīng)過(guò)程的前提條件是__________,PCR技術(shù)利用了DNA的__________原理解決了這個(gè)問(wèn)題。
(5)在對(duì)樣品DNA分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn),DNA摻雜著一些組蛋白,要去除這些組蛋白可加入的物質(zhì)是__________。
答案:(1)5′—G—A—OH
HO—A—G—5′
5′—G—G…T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72 ℃
(2)3′—C—C……A—G—5′
5′—G—G……T—C—3′
5′—G—G……T—C—3′
3′—C—C……A—G—5′
(3)每個(gè)DNA分子各有一條鏈含32P 1/2n
(4)DNA解旋 熱變性
(5)蛋白酶
解析:(1)DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA,只能從3′端延伸DNA鏈,所以引物就提供了5′端,子鏈延伸方向?yàn)?′→3′,引物Ⅰ與b鏈部分堿基互補(bǔ),引物Ⅱ則與a鏈部分堿基互補(bǔ),且連接到a鏈的3′端,故引物Ⅱ的結(jié)構(gòu)為5′—G—A—OH,復(fù)性結(jié)果為:
5′—G—G……T—C—3′
HO—A—G—5′
(2)經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,產(chǎn)生的兩個(gè)DNA分子分別含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。
(3)由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P標(biāo)記,所以新合成的子鏈均含有放射性,一次循環(huán)后的兩個(gè)DNA各有一條鏈含32P。若復(fù)制n次,產(chǎn)生子鏈共2n×2,其中只有DNA母鏈不含32P,則其所占比例為2/(2n×2)=1/2n。
(4)DNA復(fù)制是以兩條母鏈為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行的,因此,首先要解旋,使兩條母鏈的堿基暴露出來(lái),才能按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則把相應(yīng)的堿基一個(gè)個(gè)地連接起來(lái)。只有解旋后再以母鏈為模板合成一小段引物,引物才起作用。DNA分子在80~100 ℃的溫度范圍內(nèi)變性,雙鏈解開(kāi)成單鏈,當(dāng)溫度慢慢降低時(shí),又能重新結(jié)合形成雙鏈。
(5)本題考查了DNA中雜質(zhì)蛋白質(zhì)的去除,利用酶的專一性,加入蛋白酶即可去除。
規(guī)律方法:引物的作用是提供DNA聚合酶的起點(diǎn)3′端,DNA體外擴(kuò)增同細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制一樣都是半保留復(fù)制,DNA分子的兩條母鏈分別作為模板,合成新的DNA鏈。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
2.在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析。PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題:
(1)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出引物Ⅱ,并在復(fù)性這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。
(2)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。
(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點(diǎn):__________,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_(kāi)_________。
(4)PCR反應(yīng)過(guò)程的前提條件是__________,PCR技術(shù)利用了DNA的__________原理解決了這個(gè)問(wèn)題。
(5)在對(duì)樣品DNA分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn),DNA摻雜著一些組蛋白,要去除這些組蛋白可加入的物質(zhì)是__________。
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科目:高中生物 來(lái)源:2010-2011學(xué)年浙江省杭州市西湖高級(jí)中學(xué)高二4月月考生物試卷 題型:單選題
在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析,PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。下圖為某一次循環(huán)的產(chǎn)物,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。
(1)DNA的羥基(—OH)末端稱為 ,圖中所示的羥基端為 。(填字母)
(2)以引物為標(biāo)記,可判斷出此產(chǎn)物最早為第 次循環(huán)的產(chǎn)物。一次循環(huán)包括的三個(gè)環(huán)節(jié)是 。
(3)請(qǐng)根據(jù)右圖,在橫線處寫(xiě)出引物Ⅱ。
(4) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為 。某樣品DNA分子中共含3000個(gè)堿基對(duì),堿基數(shù)量滿足:(A+T)/(G+C)=1/2,若經(jīng)5次循環(huán),獲得32個(gè)與樣品相同的DNA分子,至少需要向試管中加入 個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)
(5)“PCR”與人體內(nèi)DNA復(fù)制相比,有何特殊之處?(答出2項(xiàng))
。
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科目:高中生物 來(lái)源:2010-2011學(xué)年山西省太原五中高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析,PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。下圖為某一次循環(huán)的產(chǎn)物,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。
(1)DNA的羥基(—OH)末端稱為 ,圖中所示的羥基端為 。(填字母)
(2)以引物為標(biāo)記,可判斷出此產(chǎn)物最早為第 次循環(huán)的產(chǎn)物。一次循環(huán)包括的三個(gè)環(huán)節(jié)是 。
(3)請(qǐng)根據(jù)右圖,在橫線處寫(xiě)出引物Ⅱ。
(4) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為 。某樣品DNA分子中共含3000個(gè)堿基對(duì),堿基數(shù)量滿足:(A+T)/(G+C)=1/2,若經(jīng)5次循環(huán),獲得32個(gè)與樣品相同的DNA分子,至少需要向試管中加入 個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)
(5)“PCR”與人體內(nèi)DNA復(fù)制相比,有何特殊之處?(答出2項(xiàng))
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科目:高中生物 來(lái)源:2012屆山西省高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:選擇題
在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析,PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段,在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝,有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。下圖為某一次循環(huán)的產(chǎn)物,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。
(1)DNA的羥基(—OH)末端稱為 ,圖中所示的羥基端為 。(填字母)
(2)以引物為標(biāo)記,可判斷出此產(chǎn)物最早為第 次循環(huán)的產(chǎn)物。一次循環(huán)包括的三個(gè)環(huán)節(jié)是 。
(3)請(qǐng)根據(jù)右圖,在橫線處寫(xiě)出引物Ⅱ。
(4) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為 。某樣品DNA分子中共含3000個(gè)堿基對(duì),堿基數(shù)量滿足:(A+T)/(G+C)=1/2,若經(jīng)5次循環(huán),獲得32個(gè)與樣品相同的DNA分子,至少需要向試管中加入 個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)
(5)“PCR”與人體內(nèi)DNA復(fù)制相比,有何特殊之處?(答出2項(xiàng))
。
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