Question

【題目】Ⅰ.同學從溫度為55～65℃的泉 水中篩選出能合成脂肪酶的細菌，并從該細菌中提取了脂肪酶�；卮饐栴}：

（1）測定脂肪酶活性時，應選擇________________作為該酶作用的物質，反應液中應加入________________溶液以維持其酸堿度穩(wěn)定。

（2）要鑒定該酶的化學本質，可將該酶液與雙縮脲試劑混合，若反應液呈紫色，則該酶的化學本質為________________。

（3）根據(jù)該細菌的生活環(huán)境，簡要寫出測定該酶催化作用最適溫度的實驗思路。_____________________________

Ⅱ.依據(jù)表中結果，金屬離子________________對該酶的活性有一定的促進作用。金屬離子對酶的活性有促進或抑制作用，可能的原因是______________________________________。

Answer 1

【答案】脂肪緩沖蛋白質在一定溫度范圍內（包括55～65℃）設置溫度，分別測量酶活性，若所測數(shù)據(jù)出現(xiàn)內峰值，則峰值所對應的溫度即為該酶催化化用的最適溫度。否則,擴大溫度范圍。繼續(xù)實驗，直到出現(xiàn)峰值Mn2+金屬離子與酶結合可以改變酶的空間結構

【解析】

根據(jù)酶的專一性，要測定脂肪酶的活性則需要脂肪為底物；若進一步測定酶的化學本質是蛋白質，則需要用檢測蛋白質的試劑——雙縮脲試劑，若出現(xiàn)紫色則為蛋白質。若還要測定脂肪酶的最適溫度，則需要在適宜的PH等環(huán)境條件下，結合脂肪酶有活性的溫度范圍內設置一系列溫度梯度，若出現(xiàn)活性峰值，則確定為該酶的最適溫度。

Ⅰ.（1）測定脂肪酶活性，應該以脂肪為唯一底物，讓脂肪酶進行作用；緩沖溶液可以維持反應液中酸堿度的穩(wěn)定。

（2）用雙縮脲試劑的特異性檢測，若反應呈現(xiàn)紫色則為蛋白質，即說明該酶的化學本質為蛋白質。

（3）運用控制變量法，以溫度為自變量，酶的活性為因變量，在一定溫度范圍（包括55℃~65℃）內設置溫度梯度，分別測定酶的活性，若得到數(shù)據(jù)的峰值，峰值對應的即為酶催化作用的最適溫度。否則，需擴大溫度范圍，繼續(xù)實驗，直到出現(xiàn)峰值。

Ⅱ.根據(jù)表格數(shù)據(jù)，當培養(yǎng)基中添加Mn2+時，能使該酶的活性升高（比對照組的活性100高），說明Mn2+對該酶的活性有一定的促進作用。金屬離子是通過與酶結合后，改變酶空間結構來影響酶活性的。