Question

研究發(fā)現(xiàn)：端粒在不同物種細(xì)胞中對于保持染色體穩(wěn)定性和細(xì)胞活性有重要作用，端粒酶是一種逆轉(zhuǎn)錄酶，能延長縮短的端粒（縮短的端粒其細(xì)胞復(fù)制能力受限），從而增強(qiáng)體外細(xì)胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉(zhuǎn)化。科學(xué)家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長增殖以尋找一種抑制腫瘤細(xì)胞的新途徑。

方法思路：

①構(gòu)建干擾質(zhì)粒________（插入針對人體端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶亞基（hTERT）的mRNA的干擾序列）和對照質(zhì)粒PSG－CTR（插入不針對人體任何mRNA序列的對照組序列）。

②將空質(zhì)粒PSG（不含目的基因）、干擾質(zhì)粒和對照質(zhì)粒分別感染肝癌細(xì)胞。

③一段時間后觀察檢測細(xì)胞的________。計(jì)算細(xì)胞凋亡率，繪制肝癌細(xì)胞生長曲線。結(jié)果如下圖：

請回答：

（1）完成實(shí)驗(yàn)步驟中的空格：

①________；②________。

（2）在構(gòu)建質(zhì)粒時，要將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞并用________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構(gòu)建的表達(dá)載體質(zhì)粒上必須含有________。

（3）端粒酶可以通過以自身的________為模板，________為原料來合成端粒DNA。

（4）根據(jù)題意請分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果并得出結(jié)論。

____________________________。

Answer 1

答案：
解析：

�。�1）①PSG－AS 　�、鄱肆Ｃ富钚�、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長情況 　�。�2）選擇；標(biāo)記基因 　　（3）RNA；4種脫氧核苷酸 　　（4）從結(jié)果可知PSG－AS導(dǎo)入肝癌細(xì)胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細(xì)胞凋亡率升高，細(xì)胞生長受抑制，說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細(xì)胞。