（12分）下圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程。請(qǐng)分析回答：

(1)過(guò)程①使用的         酶能使特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的           （化學(xué)鍵）斷開(kāi)。運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過(guò)                           而結(jié)合。 過(guò)程②需要用到        酶，
(2圖中A的名稱是____________，它重組成功的物質(zhì)基礎(chǔ)是__________________ __________的結(jié)構(gòu)組成相同。
(3)A上應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為　　　　。為直接檢測(cè)干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取　　　　__與用放射性同位素標(biāo)記的____________作探針進(jìn)行分子雜交，。
（4）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成           ，除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和          酶，并適時(shí)調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng)。
（5）在該工程中所用的基因“剪刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是—G′GATCC—。
請(qǐng)畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過(guò)程圖

(1)（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） 磷酸二酯鍵  堿基互補(bǔ)原則 DNA連接酶 
(2)重組載體(重組質(zhì)粒) 　干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA
（3）啟動(dòng)子  RNA  目的基因
（4）引物    DNA聚合酶（Taq酶）
（5）     —G′GATCC—              —G         GATCC—
—C  CTAGG—              —CCTAG         G—

解析

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（8分）菊天牛是菊花的主要害蟲之一�？蒲腥藛T將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作為標(biāo)記基因，菊花葉片對(duì)卡那霉素高度敏感。）

（1）為了促進(jìn)土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用______________處理土壤農(nóng)桿菌，使其處于感受態(tài)。

（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠_______________________的特點(diǎn)，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞中，并插入到菊花細(xì)胞的_______________上，最終形成轉(zhuǎn)基因植株。

（3）將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素和_____________的培養(yǎng)基中，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。

（4）用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時(shí)，需根據(jù)________________的核苷酸序列設(shè)計(jì)特異引物，以________________為模板進(jìn)行第一輪擴(kuò)增。

（5）將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2 齡幼蟲，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。

組別

死亡率（%）

實(shí)驗(yàn)組

轉(zhuǎn)基因植株1

60.00

轉(zhuǎn)基因植株2

53.33

對(duì)照組

13.33

 

 

 

 

 

①對(duì)照組應(yīng)飼喂等量的_______________________________。

②據(jù)表分析，______________________________差異顯著，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。

 

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（12分）下圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程。請(qǐng)分析回答：

(1) 過(guò)程①使用的          酶能使特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的            （化學(xué)鍵）斷開(kāi)。運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過(guò)                            而結(jié)合。 過(guò)程②需要用到         酶，

(2圖中A的名稱是____________，它重組成功的物質(zhì)基礎(chǔ)是__________________ __________的結(jié)構(gòu)組成相同。

(3) A上應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為　　　　。為直接檢測(cè)干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取　　　　__與用放射性同位素標(biāo)記的____________作探針進(jìn)行分子雜交，。

（4）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成            ，除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和           酶，并適時(shí)調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng)。

（5）在該工程中所用的基因“剪刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是—G′GATCC—。

請(qǐng)畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過(guò)程圖

 

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（2）獲�、诘耐緩街饕�                    、PCR技術(shù)擴(kuò)增 、 人工合成。

（3）有人對(duì)這種牛奶不敢食用，人們對(duì)這種轉(zhuǎn)基因食品的擔(dān)心表現(xiàn)在（寫出一個(gè)理由即可）

                                                                               。

 

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下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：

（1）隨著科技發(fā)展，獲取目的基因的方法也越來(lái)越多，若乙圖中的“抗蟲基因”是利用甲圖中的方法獲取的，這種獲取方法屬于____________________。③是在______________（填“酶的名稱”）作用下進(jìn)行延伸的。

（2）在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。乙圖為獲得抗蟲棉技術(shù)的流程,圖中將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞采用的方法是________________。  C 過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入 ________________。

（3）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的具體方法是使用________________與提取出的mRNA分子雜交。

 

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