Question

【題目】為了研究不同“層次”血清對(duì)細(xì)胞增殖的影響，科研人員做了以下實(shí)驗(yàn)：將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時(shí)間。取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標(biāo)記為上、中、下，再分別從三個(gè)瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均勻備用。分別取等量的不同“層次”的血清和混合血清加入到新配制的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中，再接種小鼠上皮細(xì)胞（接種細(xì)胞密度為5×104個(gè)/mL），在適宜條件下培養(yǎng)72 h后，進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果如下表。請(qǐng)回答：

組別	上	中	下	混
72h細(xì)胞數(shù)/個(gè)mL-1	9.75×104	1.04×105	7.5×104	1.85×105

（1）細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2的主要作用是____________，每天更換培養(yǎng)基的目的是____________。

（2）培養(yǎng)液中加入動(dòng)物血清的作用是____________，還加入一定量抗生素的目的是____________。

（3）如果用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)進(jìn)行如圖所示的操作，統(tǒng)計(jì)出來的數(shù)據(jù)比實(shí)際值偏____________。正確的操作方法應(yīng)該是____________。

（4）從表中結(jié)果可以看出，不同“層次”的血清對(duì)細(xì)胞增殖的影響不同。造成這種結(jié)果的主要原因是不同“層次”血清中____________。

（5）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是____________。

Answer 1

【答案】維持培養(yǎng)液的pH 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，去除代謝廢物，利于細(xì)胞增殖 補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所需的未知物質(zhì) 防止雜菌污染 高 先蓋上蓋玻片，后滴細(xì)胞懸液 成分不同 將血清充分混勻后加入到培養(yǎng)液中

【解析】

分析表格：表中為上、中、下三層血清及混合血清中細(xì)胞增殖情況，不同“層次”的血清對(duì)細(xì)胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，因此在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加入到培養(yǎng)液中。

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，即95%空氣+5%二氧化碳，其中二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；每天更換培養(yǎng)基可以補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并能去除代謝廢物，這樣有利于細(xì)胞增殖。

（2）培養(yǎng)液中加入動(dòng)物血清的作用是補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所需的未知物質(zhì)，還加入一定量抗生素的目的是防止雜菌污染。

（3）如果用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)，應(yīng)該先蓋上蓋玻片，后滴加細(xì)胞懸液，若先滴加細(xì)胞懸液，后蓋上蓋玻片，則統(tǒng)計(jì)出來的數(shù)據(jù)比實(shí)際值偏大。

（4）由表可知，不同“層次”的血清對(duì)細(xì)胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，原因主要是不同“層次”血清中營(yíng)養(yǎng)成分不同。

（5）由表可知混合血清中細(xì)胞增殖速率最快，因此在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加入到培養(yǎng)液中。