Question

12．如表是用于從土壤中分離純化細菌的培養(yǎng)基配方．

材料	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
用量	5g	10g	5g	20g	1000mL

請回答：
（1）培養(yǎng)基的類型很多，按照“細菌喜葷，霉菌喜素”的原則配制上述培養(yǎng)基后，一般還要調(diào)節(jié) pH 并對培養(yǎng)基進行滅菌處理．
（2）分離純化微生物最常使用的劃線分離法中，接種環(huán)在菌液中蘸菌液A（A．一B．二C．三D．四）次；若用涂布分離法，則制備細菌懸液時，一般需進行稀釋處理，為確保操作過程不被雜菌污染，接種必須在酒精燈火焰附近操作．
（3）假設(shè)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是什么？（列舉一項）．稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）培養(yǎng)基的類型很多，按照“細菌喜葷，霉菌喜素”的原則配制上述培養(yǎng)基后，一般還要調(diào)節(jié) pH 并對培養(yǎng)基進行滅菌處理．
（2）分離純化微生物最常使用的劃線分離法中，接種環(huán)在菌液中蘸菌液一次；若用涂布分離法，則制備細菌懸液時，為防止菌液中的微生物過多，一般需進行稀釋處理，為確保操作過程不被雜菌污染，接種必須在酒精燈火焰附近操作．
（3）假設(shè)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染．
故答案為：
（1）葷    素    滅菌
（2）A     稀釋    酒精燈火焰
（3）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)和分離，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分，識記分離純化微生物的兩種方法，意在強化學生對相關(guān)知識的識記和理解，提高學生的實驗技能．