Question

【題目】如圖是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)蘇云金桿菌（Bt）毒素蛋白基因植物的過程示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），表格內(nèi)是3種相關(guān)限制酶的識別序列與酶切位點示意圖．

（1）圖過程②是基因工程基本步驟，稱為_____。

（2）運用HindⅢ與BamHI酶切目的基因與質(zhì)粒，并加入DNA連接酶來構(gòu)建重組質(zhì)粒的方法的缺點是_____。．為了改善上述問題，可以改用_____酶。

（3）本實驗選用的運載體是圖中的_____，他們的基本單位是_____。

（4）下列關(guān)于質(zhì)粒運載體的說法正確的是_____。

A．質(zhì)粒運載體作用之一是防止目的基因被核酸酶降解

B．質(zhì)粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C．目的基因插人質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒運載體的復(fù)制和表達

D．③中Ti質(zhì)粒的T﹣DNA片段可以協(xié)助目的基因?qū)�入植物細�?/span>

E．沒有限制酶就無法使用質(zhì)粒運載體

Answer 1

【答案】將目的基因與運載體重組 該種方法會產(chǎn)生4種重組質(zhì)粒，不利于篩選 BstI或BamH I pBR質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒 脫氧核苷酸 ACDE

【解析】

（1）據(jù)圖分析，圖1中②表示基因表達載體的構(gòu)建過程。

（2）運用HindⅢ與BamHI酶切目的基因與質(zhì)粒，并加入DNA連接酶來構(gòu)建重組質(zhì)粒的方法會產(chǎn)生4種重組質(zhì)粒，不利于篩選。為了改善上述問題，可以改用BstI或BamHI酶。

（3）由圖可知，本實驗選用的運載體是pBR質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒，它們都是雙鏈環(huán)狀DNA分子，因此基本單位是脫氧核苷酸。

（4）A、質(zhì)粒運載體作用之一是防止目的基因被核酸酶降解，A正確；

B、質(zhì)粒運載體本身可以進入細胞，不一定要與目的基因重組，B錯誤；

C、目的基因插人質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒運載體的復(fù)制和表達，C正確；

D、Ti質(zhì)粒的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此可以協(xié)助目的基因?qū)�入植物細胞�?/span>D正確；

E、作為運載體要有限制酶的切割位點，因此沒有限制酶就無法使用質(zhì)粒運載體，E正確。

故選ACDE。