Question

17．研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌的發(fā)生及惡性發(fā)展與端粒酶活性高有關(guān)．為尋找抑制胰腺癌細(xì)胞增殖存活偶的有效途徑，研究人員針對(duì)人端粒酶RNA（hTR）序列（5′-CCUAAC-3′）合成3種寡核苷酸：PS-ODN1、PS-ODN2和PS-ODN3．分別將3種寡核苷酸加入胰腺癌P3細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液中，在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，測(cè)定細(xì)胞存活率和P3細(xì)胞端粒酶活性，記過(guò)如下表．表PS-ODN處理后細(xì)胞存活率和端粒酶活性

	序列	成纖維細(xì)胞存活率%	P3細(xì)胞存活率%	P3細(xì)胞端粒酶相對(duì)活性
PS-ODN1	5′-GTTAGG-3′	103.04	33.34	0.28
PS-ODN2	5′-CCTAAC-3′	95.36	81.37	0.97
PS-ODN3	5′-AACTCC-3′	106.4	91.54	0.95

請(qǐng)回答問(wèn)題：
（1）癌細(xì)胞表面糖蛋白減少，導(dǎo)致其極易在體內(nèi)擴(kuò)散．部分胰腺癌患者出現(xiàn)血糖升高的癥狀，其原因是胰島素分泌不足．
（2）將胰腺癌P3細(xì)胞和人皮膚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)在含有葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽、血清等等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（答出兩種即可）的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)過(guò)程中需充入5%CO₂，其目的是調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)液的PH值．
（3）測(cè)定細(xì)胞存活率時(shí)以不含PS-ODN的培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)量為100%．有表中數(shù)據(jù)可知，PS-ODN₁可引起P3細(xì)胞存活率明顯下降，其原因是寡核苷酸序列可以與hTR序列堿基互補(bǔ)配對(duì)，從而降低端粒酶的活性．
（4）PS-ODN序列對(duì)成纖維細(xì)胞的存活率無(wú)顯著影響，是因?yàn)槌衫w維細(xì)胞的端粒酶活性低．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境：無(wú)菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無(wú)毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害．
（2）營(yíng)養(yǎng)：
成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．O₂：是細(xì)胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
2、癌細(xì)胞的主要特征：失去接觸抑制，能無(wú)限增殖；細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；細(xì)胞表面發(fā)生變化，細(xì)胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，細(xì)胞間的黏著性降低，細(xì)胞易擴(kuò)散轉(zhuǎn)移．

解答 解：（1）癌變細(xì)胞膜上的糖蛋白減少，細(xì)胞間的黏著性降低，癌細(xì)胞容易在體內(nèi)轉(zhuǎn)移．部分胰腺癌患者胰，因?yàn)閸u素分泌不足，出現(xiàn)血糖升高的癥狀．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．還需要?dú)怏w環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．O₂是細(xì)胞代謝所必需的．CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（3）測(cè)定細(xì)胞存活率時(shí)以不含PS-ODN的培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)量為100%．有表中數(shù)據(jù)，作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)．據(jù)表中的數(shù)據(jù)可知，含PS-ODN₁培養(yǎng)液的培養(yǎng)P3細(xì)胞，P3細(xì)胞存活率最低，其原因是寡核苷酸序列可以與hTR序列堿基互補(bǔ)配對(duì)，從而降低端粒酶的活性．
（4）可能是因?yàn)槌衫w維細(xì)胞的端粒酶活性低，所以PS-ODN序列對(duì)成纖維細(xì)胞的存活率無(wú)顯著影響．
故答案為：
（1）糖蛋白    胰島素分泌不足
（2）葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽、血清等       調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)液的PH值
（3）不含PS-ODN    PS-ODN₁      堿基互補(bǔ)配對(duì)
（4）成纖維細(xì)胞的端粒酶活性低

點(diǎn)評(píng) 本題考查細(xì)胞癌變、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力、判斷能力和能題中信息對(duì)各項(xiàng)作出準(zhǔn)確的判斷，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題的能力．