Question

紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的。我們可以選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

（1）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。

①其中加入檸檬酸鈉的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②此過程即是樣品處理，它應(yīng)包括紅細(xì)胞洗滌、　　　　　　　　 、分離血紅蛋白溶液。

③洗滌紅細(xì)胞的目的是　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。

①透析的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②透析的原理是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS?聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。其中通過凝膠色譜法將樣品純化的目的是　　　　　　　　　　　　　 　　　。

 

Answer 1

（1）①防止血液凝固 ②血紅蛋白的釋放 ③去除雜蛋白 （2）①去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) ②透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)

（3）通過凝膠色譜法去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)

 

（1）檸檬酸鈉是一種抗凝劑，加入檸檬酸鈉可以防止血液凝固；樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液；洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。（2）透析袋一般是用硝酸纖維素制成的，透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)，透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)或用于更換樣品的緩沖液。（3）凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法，因此，通過用凝膠色譜法去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)。