（12分）大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶，當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。右圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題：
（1）作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用__________溶液處理（增加其細胞壁的通透性）過的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，并加入在試管Ⅰ中制備好的DNA。
（2）圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入____________________等物質(zhì)，用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
（3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，請預(yù)測菌落的顏色，并分析結(jié)果：
①                                                                     。
②                                                                     。
（4）應(yīng)如何設(shè)計檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒培養(yǎng)的對照實驗？

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

大腸桿菌是生物學及醫(yī)學實驗研究中最有代表性的模式生物之一。

（1）大腸桿菌與飲水安全。

    國家規(guī)定，每升飲用水中大腸菌數(shù)不得超過3個。有人測定某飲用水中的大腸桿菌（群）數(shù)：先將1升飲用水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣的2毫升，涂布到5個培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng)，培養(yǎng)后計數(shù)的菌落數(shù)分別是9、12、5、8、6。請回答下列問題：

1）根據(jù)上述結(jié)果計算，被檢水樣大腸菌群數(shù)為________，水樣________ （能、不能）達標。2）檢測過程中需要培養(yǎng)大腸菌菌群，培養(yǎng)基配方如下：

瓊脂

蛋白胨

乳糖

蔗糖

K2HPO4

伊紅

美藍

蒸餾水

pH

15 g

10 g

5 g

5 g

2 g

0.4 g

0. 065 g

1000 mL

7.2

    從培養(yǎng)基配方可以確定大腸桿菌的營養(yǎng)類型是                 ；從培養(yǎng)基功能可以確定其類型是              培養(yǎng)基，理由是                                    。

3）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_______________________________________________________。

（2）大腸桿菌與基因工程。

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶。當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答問題：

1）質(zhì)粒結(jié)構(gòu)特點是                       。

2）作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因，原因是                             。

3）試管Ⅱ中用氯化鈣溶液處理（增加其細胞壁的通透性）過的受體大腸桿菌，并在培養(yǎng)基中加入                                   。

3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，請預(yù)測菌落的顏色，并分析結(jié)果：

①                                                                               。

②                                                                               。

（3）選擇大腸桿菌作為研究材料，主要原因是：它體積小、結(jié)構(gòu)簡單、             、

             等。

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科目：高中生物 來源：浙江省五校2009—2010學年度高三第一次聯(lián)考（生物）試題 題型：綜合題

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶，當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題：

（1）作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理（增加其細胞壁的通透性）過的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，并加入          。
（2）圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入____________________等物質(zhì)，用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
（3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，請預(yù)測菌落的顏色，并分析結(jié)果：
①                                                          。
②                                                           。

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科目：高中生物 來源：2014屆浙江東陽中學高三10月月考生物試卷（解析版） 題型：選擇題

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒具有氨芐青霉素抗性基因，某限制性核酸內(nèi)切酶唯一切點位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。在特定的選擇培養(yǎng)基中，若lacZ基因沒有被破壞，則大腸桿菌菌落呈藍色；若lacZ基因被破壞，則菌落呈白色。右圖表示轉(zhuǎn)基因操作過程。下列說法錯誤的是

A．作為受體大腸桿菌應(yīng)不含氨芐青霉素抗性基因，以便于篩選

B．若大腸桿菌的菌落為藍色，則質(zhì)粒未導(dǎo)入大腸桿菌

C．選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入適量氨芐青霉素

D．應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進行擴大培養(yǎng)

 

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科目：高中生物 來源：2012-2013學年浙江省高三第一次月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（6分）大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶，當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。右圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題：

（1）作為受體大腸桿菌應(yīng)______________________，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理（目的是                        ）過的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，并加入                      。

（2）圖中的培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入___________等物質(zhì)，用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。

（3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)

入重組質(zhì)粒，請預(yù)測菌落的顏色，并分析結(jié)果：

①                                                                         。

②                                                                         。

 

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科目：高中生物 來源：浙江省五校2009—2010學年度高三第一次聯(lián)考（生物）試題 題型：選擇題

大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶，當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題：

   （1）作為受體大腸桿菌應(yīng)__________________________，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理（增加其細胞壁的通透性）過的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，并加入           。

   （2）圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入____________________等物質(zhì)，用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。

   （3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，請預(yù)測菌落的顏色，并分析結(jié)果：

①                                                           。

②                                                            。

 

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