Question

12．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如下：

（1）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射 ①促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過 ②獲能處理，才具備受精能力．
（2）將htPA基因與質(zhì)粒構(gòu)建重組表達(dá)載體的過程中，下列哪項(xiàng)是必需的（③A）
A．限制酶和DNA連接酶      B．DNA連接酶和DNA聚合酶
C．DNA聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶    D．限制酶和DNA聚合酶
（3）轉(zhuǎn)基因羊的培育過程中，常用受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞，主要原因是 ④受精卵的全能性易于表達(dá)．
為了獲得母羊，胚胎移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行 ⑤性別鑒定．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這些個(gè)體的基因型 ⑥相同．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到 ⑦h(yuǎn)tPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
（5）質(zhì)粒是基因工程中常用的基因載體，下列哪項(xiàng)不是質(zhì)粒作為基因載體必需的（⑧D）
A．具控制質(zhì)粒轉(zhuǎn)移的基因        B．具標(biāo)記基因      C．具多個(gè)限制酶的單切點(diǎn)        D．具有終止密碼．

Answer 1

分析 DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
目的基因分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
該基因工程需要對(duì)羊的性別進(jìn)行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．

解答 解：（1）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能處理，才具備受精能力．
（2）將htPA基因與質(zhì)粒構(gòu)建重組表達(dá)載體的過程中，需要用到的工具酶為限制酶和DNA連接酶．
（3）轉(zhuǎn)基因羊的培育過程中，常用受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞，主要原因是受精卵的全能性易于表達(dá)．為了獲得母羊，胚胎移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這些個(gè)體的生殖方式屬于無性生殖，這些個(gè)體的基因型相同．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
（5）作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來．而終止密碼存在于mRNA上，不存在于質(zhì)粒．
故答案為：
（1）促性腺激素    獲能處理
（2）A
（3）受精卵的全能性易于表達(dá)    性別鑒定    相同
（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）
（5）D

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進(jìn)行胚胎移植；要求考生具有扎實(shí)的基礎(chǔ)知識(shí)，難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的考查．