Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題：

（一）炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。對(duì)炭疽病疑似患者，可通過(guò)甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確診，其中實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。

（1）若要從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用無(wú)菌玻璃刮刀涂勻，該接種方法稱為____________。乙圖所示的四種菌落分布圖中，該接種方法不能得到的是_________________。

（2）制備甲圖中的液體培養(yǎng)基時(shí)需采取______________法滅菌。接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上___________培養(yǎng)24小時(shí)，可疑菌會(huì)大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁。

（3）甲圖中，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組試管同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組________（高/低），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此判斷的依據(jù)是______________。

（二）印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物，通過(guò)胚胎工程技術(shù)，可以讓家貓代孕而繁育，主要步驟如下圖所示。

（1）步驟甲、乙分別是指 ___________、_______________。

（2）卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后，要使用超聲監(jiān)視器確定_______________的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出_______________，在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)得到成熟的卵細(xì)胞。

（3）若在早期細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)某個(gè)細(xì)胞出現(xiàn)變異性狀，科研人員提取這個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，此種培養(yǎng)方法稱為___________。培養(yǎng)過(guò)程中,下列哪種細(xì)胞比較難以克隆？_____________

A.有限細(xì)胞系

B.無(wú)限細(xì)胞系

C.轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

D.腫瘤細(xì)胞系

Answer 1

【答案】 涂布分離法 D 高壓蒸汽滅菌 震蕩 低 噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降 體外受精或受精作用 胚胎移植 卵泡 卵母細(xì)胞（或次級(jí)卵母細(xì)胞） 克隆培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆 A

【解析】分析題圖：(一）微生物實(shí)驗(yàn)室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計(jì)算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟；(二）步驟甲為受精作用，步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素，受精過(guò)程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫�溶液，早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分，除了一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

(一）

(1)稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分布涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．由圖中四種菌落分布情況可知，A、B和C是采用稀釋涂布平板法得到的，而D是采用平板劃線法得到的。

(2) 制備圖1中的液體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌 法進(jìn)行滅菌，以殺死微生物及芽孢．接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁。

(3) 對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清。

(二）

(1) 步驟甲為受精作用，步驟乙為胚胎移植；

(2) 卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后，要使用超聲監(jiān)視器確定卵泡的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出卵母細(xì)胞（或次級(jí)卵母細(xì)胞）。

(3) 提取這個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，此種培養(yǎng)方法稱為克隆培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆。有限細(xì)胞系由于增殖能力有限（10-50代），轉(zhuǎn)化細(xì)胞具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力，容易克隆。