Question

【題目】電影《我不是藥神》引起人們對慢性粒細胞白血病（CML）的關(guān)注，CML患者的造血干細胞中22號染色體上的bcr基因與來自9號染色體上的基因abl形成bcr/abl融合基因，該融合基因的表達產(chǎn)物能促進骨髓細胞內(nèi)mTOR蛋白過度表達從而引起白血病�？�mTOR單克隆抗體可抑制mTOR蛋白的作用而治療CML。回答下列問題：

（1）科學(xué)家用__________________對小鼠進行注射，一段時間后從小鼠脾臟提取出B淋巴細胞；他們通過動物細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細胞，培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液，原因是___________。

（2）使用_____________（生物的方法）將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，置于選擇培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞，并經(jīng)過_________培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后獲得的細胞具有的特點是___________________________________，將這些細胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，在___________中提取得到。

（3）抗mTOR單克隆抗體在治療CML上，具有的特點是_______________________。

Answer 1

【答案】mTOR（蛋白） 防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害 滅活的（仙臺）病毒 克隆化 能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一性抗體 腹水 特異性強、靈敏度高，并可大量制備

【解析】

1、取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境；②營養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

3、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞得到單克隆抗體。

（1）mTOR蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，能刺激漿細胞的形成。培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細胞需要定期更換培養(yǎng)液的原因是防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（2）可使用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)骨髓瘤細胞和經(jīng)免疫的B淋巴細胞融合。經(jīng)過篩選后符合要求的雜交瘤細胞能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一性抗體。

（3）單克隆抗體的特點是特異性強、靈敏度高，并可大量制備。