Question

7．（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
（2）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．其中，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟．
（2）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)在含CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液pH．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建
（2）維持培養(yǎng)液的PH

點(diǎn)評(píng) 本題比較基礎(chǔ)，考查基因工程的原理及技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，只要考生識(shí)記基因工程的操作步驟和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件即可正確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．