Question

甲型血友病是由X染色體上的隱性基因導致的遺傳病(H對h為顯性)。圖1中兩個家系都有血友病發(fā)病史。Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一個性染色體組成是XXY的非血友病兒子(Ⅳ2),家系中的其他成員性染色體組成均正常。

(1)根據(jù)圖1, (填“能”或“不能”)確定Ⅳ2兩條X染色體的來源;Ⅲ4與正常女子結婚,推斷其女兒患血友病的概率是 。

(2)兩個家系的甲型血友病均由凝血因子Ⅷ(簡稱F8,即抗血友病球蛋白)基因堿基對缺失所致。為探明Ⅳ2的病因,對家系的第Ⅲ、Ⅳ代成員F8基因的特異片段進行了PCR擴增,其產物電泳結果如圖2所示,結合圖1,推斷Ⅲ3的基因型是 。請用圖解和必要的文字說明Ⅳ2非血友病XXY的形成原因。

(3)現(xiàn)Ⅲ3再次懷孕,產前診斷顯示胎兒(Ⅳ3)細胞的染色體為46,XY;F8基因的PCR檢測結果如圖2所示。由此建議Ⅲ3 。

(4)補給F8可治療甲型血友病。采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時,在凝膠裝填色譜柱后,需要用緩沖液處理較長時間,其目的是 ;

若F8比某些雜蛋白先收集到,說明F8的相對分子質量較這些雜蛋白 。

(5)利用轉基因豬乳腺生物反應器可生產F8。要使乳腺細胞合成F8,構建表達載體時,必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的 等調控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得,該cDNA比染色體上的F8基因短,原因是該cDNA沒有 。

(6)為獲得更多的轉基因母豬,可以采用體細胞克隆技術,將純合轉基因母豬的體細胞核注入

,構建重組胚胎進行繁殖。

 

Answer 1

(1)不能 0

(2)XHXh 圖解如下

在Ⅲ3形成卵細胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期,帶有基因H的姐妹染色單體移向細胞同一極,形成XHXH卵細胞。XHXH卵細胞與正常精子結合形成XHXHY受精卵。

(3)終止妊娠

(4)洗滌平衡凝膠,并使凝膠裝填緊密 大

(5)啟動子 內含子

(6)去核的卵母細胞

【解析】(1)非血友�、�2基因組成為XHX—Y,其父母基因型分別是XhY和XHX—,都有可能產生異常配子XhY或XHX—,所以不能確定Ⅳ2兩條X染色體的來源。Ⅲ4的基因型是XHY,正常女子基因型為XHXH或XHXh,兩人結婚后女兒基因型為XHXH或XHXh,故患病概率為0。(2)由圖1知Ⅲ2基因型是XhY,含h基因,其F8基因的特異片段電泳結果只出現(xiàn)一條帶,可知下面的這一條帶代表h基因,從而推知上面一條帶代表H基因,故Ⅲ3的基因型分別是XHXh。Ⅳ2父母Ⅲ2與Ⅲ3的基因型分別是XhY和XHXh,如果Ⅲ2產生正常的Y精子,而Ⅲ3在減數(shù)第二次分裂后期帶有基因H的姐妹染色單體移向細胞同一極,產生XHXH異常的卵細胞,受精后子代中出現(xiàn)非血友病XHXHY受精卵。(3)如圖2知Ⅲ3的基因型為XHXh,其再次懷孕,男性胎兒患甲型血友病概率為50%,而女兒都不患甲型血友病,當產前診斷顯示胎兒(Ⅳ3)為男性時,建議Ⅲ3終止妊娠。(4)凝膠裝填色譜柱時,緩沖液處理較長時間既能起到洗滌平衡凝膠的作用,還能保證凝膠裝填緊密。凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量大小分離蛋白質的有效方法,相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,路程較短,移動速度較快,分離時先收集到,相反,相對分子質量較小的后收集到。(5)基因表達載體要具有啟動子、標記基因、目的基因和終止子等組件,要使目的基因表達產生F8,構建表達載體時一定要有啟動子。染色體上的F8基因中含有外顯子與內含子,內含子不指導蛋白質合成,轉錄最后形成的mRNA中沒有內含子對應序列,由mRNA反轉錄形成的cDNA當然沒有內含子序列,其基因也相對較短。(6)細胞核移植技術中常用去核的卵母細胞作受體,因為其體積大,易操作,且細胞質多,營養(yǎng)豐富,細胞核的全能性容易表達。