Question

已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡(jiǎn)要的操作流程如下：

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是_______________

（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用______________、________________

（3）如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進(jìn)行________，也不能進(jìn)行______________。

（4）為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特征，可用_______________與______________________進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是_______________________________。

 

Answer 1

【答案】

（16分，每格2分）

答案　(1)逆轉(zhuǎn)錄　(2)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶　(3)復(fù)制　以其為模板合成S基因的mRNA(或轉(zhuǎn)錄)(4)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白　SARS康復(fù)病人血清　(5)相同　表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同

【解析】

試題分析：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①RNA控制DNA合成，該過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄。

（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B，必須使用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA。

（3）如果省略步驟②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進(jìn)行復(fù)制，也不能進(jìn)行以其為模板合成S基因的mRNA(或轉(zhuǎn)錄)。

（4）步驟④檢測(cè)所表達(dá)的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白與SARS康復(fù)病人血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，如果能夠特異性的結(jié)合，說(shuō)明表達(dá)成功。

(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達(dá)蛋白質(zhì)所用的目的基因相同。

考點(diǎn)：基因工程的步驟。

點(diǎn)評(píng)：本題有一定的綜合性，意在考查學(xué)生識(shí)記和理解能力。