Question

（生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題）
人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：
請(qǐng)回答：
（1）過(guò)程①代表的是

 

．
（2）過(guò)程②構(gòu)建A基因表過(guò)載體時(shí)，必須使用

 

和

 

兩種工具酶．
（3）過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是

 

，獲得的X是

 

．
（4）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的

 

所制備的疫苗．對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行

 

比較；或用圖中的

 

進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用,單克隆抗體的制備過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：本題考查單克隆抗體制備及基因工程應(yīng)用知識(shí)，結(jié)合題意分析圖解得，①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，②表示目的基因的獲取，③是細(xì)胞融合，得到的是雜交瘤細(xì)胞X．
動(dòng)物細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，最主要的用途是制備單克隆抗體．單克隆抗體的制備必須用已免疫的B淋巴（效應(yīng)B淋巴）細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)2次篩選才能選出產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后要用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在體外液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)．

解答： 解：（1）從圖中分析可知，A基因是從病毒提取的RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA后獲得的．所以過(guò)程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄．
（2）構(gòu)建基因的表達(dá)載體時(shí)，首先要將目的基因從DNA上剪切下來(lái)，所以要用到限制性核酸內(nèi)切酶，然后將用DNA 連接酶將目的基因與外源DNA連接起來(lái)．
（3）圖中將已免疫的效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合，然后經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）通過(guò)注射疫苗，可能進(jìn)行傳染病免疫預(yù)防．所以用A蛋白制作的疫苗，注射到健康人體內(nèi)，可以進(jìn)行該傳染病的免疫預(yù)防．對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可用抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合來(lái)檢測(cè)．
故答案為：
（1）逆（反）轉(zhuǎn)錄
（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制性?xún)?nèi)切酶、限制酶）     DNA連接酶
（注：兩空順序可顛倒）
（3）細(xì)胞融合       雜交瘤細(xì)胞
（4）A蛋白     核酸（基因）序列       抗A蛋白的單克隆抗體

點(diǎn)評(píng)：本題難度中等，考查了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生了解基因工程的操作步驟，了解動(dòng)物細(xì)胞工程在生產(chǎn)實(shí)踐中的運(yùn)用，掌握單克隆抗體的制備過(guò)程．