Question

科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識別序列和切點是—^↓GATC—，兩種酶切均形成黏性末端，請據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取            的方法來獲取目的基因。
（2）根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，應(yīng)用限制酶           切割質(zhì)粒，用限制酶         （只寫一種）切割目的基因。
（3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是           。
（4）人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)的原因是人和細(xì)菌共用                   。
（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長，說明已導(dǎo)入了         ，反之則沒有導(dǎo)入。

Answer 1

（1） 反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）                    （2）Ⅰ   Ⅱ   
（3）人的基因與大腸桿菌DNA的成分和結(jié)構(gòu)相同     （4）共用一套（遺傳）密碼子  
(5) 普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒（缺一不給分）

解析試題分析：獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取 ②利用PCR技術(shù)擴增 ③人工合成（化學(xué)合成）。據(jù)圖分析可知，人的生長激素基因是人工合成的，采取的方法是利用人的生長激素基因的mRNA為模板，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因被破壞，所以是用識別序列和切點是—G^↓GATCC—的限制酶Ⅰ來切割質(zhì)粒的。用識別序列和切點是—^↓GATC—的限制酶Ⅱ來切割目的基因的。
目的基因能插入宿主DNA，與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是：它們的成分和結(jié)構(gòu)相同，都是由四種脫氧核苷酸組成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。所有的生物都共用一套密碼子，所以人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)的核糖體上成功表達(dá)。
將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，因質(zhì)粒上有抗氨芐青霉素基因，且重組質(zhì)粒上的抗氨芐青霉素基因，也沒有被破壞，所以如果大腸桿菌B能夠生長，說明已導(dǎo)入了含抗氨芐青霉素基因的普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則沒有導(dǎo)入。
考點：基因工程
點評：本題難度中等，要求學(xué)生理解基因工程的概念，掌握基因工程的操作步驟，了解基因工程在生產(chǎn)實踐中的運用。