Question

【題目】通過(guò)基因工程將抗生素基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可以增強(qiáng)其抗病菌的能力。據(jù)此回答下列問(wèn)題。

（1）抗生素能選擇性地作用于細(xì)菌體細(xì)胞DNA、RNA和_______合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié)，干擾細(xì)胞的代謝作用，妨礙生命活動(dòng)或使其停止生長(zhǎng)，甚至死亡�？股�素發(fā)揮作用的主要場(chǎng)所是___________。

（2）基因工程中常需要使用DNA連接酶，既能連接黏性末端，又能連接平末端的DNA連接酶是__________________。

（3）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，包含目的基因、________、啟動(dòng)子、_________、復(fù)制原點(diǎn)。

（4）將目的基因?qū)�入植物體細(xì)胞通常用__________________，原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可_____________的特點(diǎn)。

（5）要確認(rèn)抗生素禁言是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株中該基因的______是否呈陽(yáng)性。

Answer 1

【答案】蛋白質(zhì) 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和核糖體( 蛋白質(zhì)) T4 DNA連接酶 標(biāo)記基因 終止子 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上 表達(dá)產(chǎn)物

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）抗生素能選擇性地作用于細(xì)菌體細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié)，干擾細(xì)胞的代謝作用，妨礙生命活動(dòng)或使其停止生長(zhǎng)，甚至死亡。抗生素發(fā)揮作用的主要場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和核糖體。

（2）基因工程中常需要使用DNA連接酶，既能連接黏性末端，又能連接平末端的DNA連接酶是T-DNA連接酶。

（3）基因表達(dá)載體需要包含的結(jié)構(gòu)有目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)。

（4）將目的基因?qū)�入植物體細(xì)胞通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上的特點(diǎn)。

（5）要確認(rèn)抗生素基因是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達(dá)，應(yīng)用抗原-抗體雜交的方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物是否呈陽(yáng)性。