Question

下面是某同學(xué)做自生固氮菌分離實(shí)驗(yàn)的方案和觀察結(jié)果：

NaNO3:2g	K2HPO4: 1g
KCl: 0.5g	MgSO4: 0.5g
FeSO4:0.01g	蔗糖：30g
瓊脂：15~20g	蒸餾水：1 000 mL

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模�略�?/p>

二、實(shí)驗(yàn)材料和用具（略）

三、實(shí)驗(yàn)方法和步驟

1.接種

（1）接種前，準(zhǔn)備好盛有配方如上表的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)皿中并滅菌，供實(shí)驗(yàn)用。

（2）取10 g土壤，放在無菌研缽中，注入5 mL蒸餾水，并用無菌玻璃棒攪拌均勻，備用。

（3）將接種環(huán)放在酒精燈的火焰上滅菌。將培養(yǎng)皿蓋輕輕放在桌面上，手拿培養(yǎng)皿。將接種環(huán)放在培養(yǎng)基邊緣處冷卻。然后，用接種環(huán)蘸取少許泥漿，輕輕地點(diǎn)接在培養(yǎng)基的表面上，共點(diǎn)接15~20處。

（4）接種后，輕輕地蓋上培養(yǎng)皿蓋，將培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)桌上。

2.培養(yǎng)

將接種過的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內(nèi)，在室溫下培養(yǎng)3~4 d。

3.觀察

3~4 d后，取出培養(yǎng)皿，仔細(xì)觀察培養(yǎng)基上的菌落，其中大而扁平、邊緣呈波狀或鋸齒狀并為褐色菌落的為自生固氮菌。

4.鏡檢（略）

該實(shí)驗(yàn)方案和觀察結(jié)果中有幾處明顯錯(cuò)誤，請(qǐng)指出并改正。

Answer 1

①培養(yǎng)基的配方中含有氮源是錯(cuò)誤的，應(yīng)將NaNO₃改為不含氮的鈉鹽。

②實(shí)驗(yàn)步驟接種（2）中用蒸餾水是錯(cuò)誤的，應(yīng)改為無菌水。

③實(shí)驗(yàn)步驟（3）中將培養(yǎng)皿蓋放在桌面上是錯(cuò)誤的，應(yīng)改為略微打開培養(yǎng)皿蓋。

④實(shí)驗(yàn)步驟接種（4）中沒有寫實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、接種人的姓名和日期，應(yīng)加上這些內(nèi)容。      ⑤實(shí)驗(yàn)步驟培養(yǎng)中，應(yīng)將“在室溫下培養(yǎng)3~4 d”改為“在28~30 ℃的溫度下培養(yǎng)3~4 d”。⑥實(shí)驗(yàn)步驟觀察中“仔細(xì)觀察培養(yǎng)基上的菌落，其中大而扁平、邊緣呈波狀或鋸齒狀并為褐色菌落”是錯(cuò)誤的。應(yīng)改為“仔細(xì)觀察培養(yǎng)基上稀泥漿周圍出現(xiàn)的黏液。黏液初為無色透明，后為乳白色，最后變?yōu)楹稚�”�?/p>
解析:

考查對(duì)自生固氮菌分離實(shí)驗(yàn)的掌握：（1）自生固氮菌分離實(shí)驗(yàn)的原理是：將用表土制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能正常生長(zhǎng)繁殖。

（2）分離自生固氮菌的步驟：①接種：取滅菌的無氮培養(yǎng)基，在無菌研缽中用無菌水（而不是蒸餾水）制備稀泥漿，接種時(shí)培養(yǎng)皿蓋應(yīng)略微打開以防空氣中雜菌進(jìn)入，接種后蓋上培養(yǎng)皿蓋，并在蓋上寫明實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、接種人的姓名和日期。

②培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿移入恒溫箱內(nèi)，28~30 ℃的溫度下培養(yǎng)3~4天。

③觀察：觀察培養(yǎng)基上稀泥漿周圍出現(xiàn)的培養(yǎng)物——黏液，黏液初為無色透明，后為乳白色，最后變?yōu)楹稚�，表明含有自生固氮菌。根�?jù)題干內(nèi)容和以上步驟、原理進(jìn)行對(duì)比，即可找出其中錯(cuò)誤之處。