Question

5．幽門(mén)螺旋菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素．在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)．實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：

請(qǐng)回答：
（1）在微生物培養(yǎng)的樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是④ （填序號(hào)）．
①酒精燈  ②培養(yǎng)皿  ③移液管  ④顯微鏡  ⑤涂布器
（2）在涂布平板時(shí)，取少量菌液滴加到培養(yǎng)基表面的原因是若涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過(guò)多，則會(huì)導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．
（3）在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有脲酶，它能以尿素為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶．
（4）臨床上用¹⁴C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將¹⁴C標(biāo)記的尿素分解為NH₃和¹⁴CO₂．
（5）上述（3）中的指示劑出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的顏色是因?yàn)榘睍?huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高．

Answer 1

分析 1、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．．
2、由于細(xì)菌分解在尿素的過(guò)程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法來(lái)判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅．

解答 解：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈、培養(yǎng)皿、移液管、無(wú)菌水等，但不需要顯微鏡．
（2）若涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過(guò)多，則會(huì)導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，因此在涂布平板時(shí)，取少量菌液滴加到培養(yǎng)基表面．
（3、5）由于Hp含有脲酶，它能以尿素為氮源，因此配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑；若有Hp，尿素被分解產(chǎn)生氨，pH升高，指示劑變紅，即菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶．
（4）臨床上用¹⁴C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將¹⁴C標(biāo)記的尿素分解為NH₃和¹⁴CO₂．
故答案為：
（1）④
（2）若涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過(guò)多，則會(huì)導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果
（3）尿素    酚紅     紅
（4）Hp能將¹⁴C標(biāo)記的尿素分解為NH₃和¹⁴CO₂
（5）氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握菌種分離與純化的方法和步驟，微生物的實(shí)驗(yàn)室分離是選修一的重點(diǎn)內(nèi)容，考生需重點(diǎn)掌握教材的基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)，注意歸納總結(jié)．