Question

6．對(duì)試管牛的早期胚胎進(jìn)行性別鑒定，可選擇某種性別的牛進(jìn)行繁殖，牛的性別決定方式為XY型，雄牛Y染色體上含SRY基因，其中含127bp特定片數(shù)，β珠蛋白基因普遍存在于牛的體細(xì)胞中沒(méi)改基因含250bp特定片數(shù)．
（1）無(wú)菌條件下，從牛卵巢中取出卵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中進(jìn)行成熟培養(yǎng)，獲得MⅡ期的卵母細(xì)胞，將已經(jīng)獲能的精子和培育成熟的卵母細(xì)胞供體放入受精液中進(jìn)行體外受精，此時(shí)，可利用顯微注射法將外源基因?qū)�入受精�?br />（2）將受精卵置于胚胎發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，為防止細(xì)菌等污染，培養(yǎng)液中需加入抗生素
（3）將培養(yǎng)至桑椹胚期的8枚編為1-8號(hào)，分別取胚胎的5-6個(gè)細(xì)胞，提取DNA，設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增SRY基因和β珠蛋白基因特定片段，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，結(jié)果如圖所示，圖中M為100bp梯度DNA分子量標(biāo)記，圖中標(biāo)記為10、11電泳帶的作用是對(duì)照，編號(hào)為1、4、5、7、8胚胎性別鑒定為雄性
（4）將經(jīng)過(guò)胚胎鑒定的8枚胚胎移植于經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛子宮內(nèi)，隨胚胎發(fā)育和牛犢出生，可進(jìn)一步驗(yàn)證所鑒定的性別．

Answer 1

分析 1、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精．
（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子；第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞．
（2）精子的采集和獲能收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法．對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法．
（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫�溶液中完成受精過(guò)程．
2、用SRY特異性探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，若形成雜交帶，則說(shuō)明其含有SRY基因（位于Y染色體上性別決定基因），則胚胎的性別為雄性．

解答 解：（1）體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)受精溶液或獲能液中受精．從卵巢中采集的卵母細(xì)胞一般培養(yǎng)到MⅡ成熟后才與精子共同培養(yǎng)完成受精．在基因工程中，受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射法將外源基因?qū)�入受體細(xì)胞．
（2）早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，還需要加入動(dòng)物血清等天然成分．為防止細(xì)菌等污染，培養(yǎng)液中需加入抗生素．
（3）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增SRY基因和β珠蛋白基因特定片段，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，結(jié)果如圖所示，β珠蛋白基因普遍存在于牛的體細(xì)胞中沒(méi)改基因含250bp特定片數(shù)，圖中標(biāo)記為10、11電泳帶的作用是對(duì)照，由于雄牛Y染色體上含SRY基因，用SRY特異性探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，若形成雜交帶，則說(shuō)明其含有SRY基因（位于Y染色體上性別決定基因），則胚胎的性別為雄性．因此編號(hào)為1、4、5、7、8 胚胎性別鑒定為雄性．
（4）將經(jīng)過(guò)胚胎鑒定的8枚胚胎培養(yǎng)到囊胚期或囊胚，直接移植到同期發(fā)情受體的子宮，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體．
故答案為：
（1）MⅡ獲能   顯微注射
（2）抗生素
（3）對(duì)照         1、4、5、7、8
（4）同期發(fā)情

點(diǎn)評(píng) 本題考查胚胎工程和伴性遺傳的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力；能理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，解決問(wèn)題的能力．