Question

9．2016年5月13日，美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生院科學(xué)家發(fā)表報(bào)告，他們?cè)诎�滋病病毒上發(fā)現(xiàn)一種由8個(gè)氨基酸組成的融合肽，它是病毒入侵細(xì)胞的關(guān)鍵性物質(zhì)．這一發(fā)現(xiàn)為艾滋病的預(yù)防和治療開(kāi)辟了一條新途徑．
（1）欲將融合肽設(shè)計(jì)為疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防，可能需要改造其部分結(jié)構(gòu)．
 ①一般流程是：預(yù)期新型融合肽的功能→設(shè)計(jì)新型融合肽結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列．然后用DNA合成儀（答一種儀器）合成出目的基因．要獲得大量的目的基因，需要用PCR擴(kuò)增．該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
 ②欲用牛乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)新型融合肽，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要加入牛乳腺蛋白基因啟動(dòng)子，通常選用受精卵作為受體細(xì)胞．
（2）欲大量生產(chǎn)融合肽抗體用于免疫治療，可將融合肽反復(fù)多次注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟提取B（B淋巴）細(xì)胞，將其與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，并在特定的培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細(xì)胞，再通過(guò)（多次）克隆化培養(yǎng)和（專(zhuān)一）抗體（陽(yáng)性）檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生融合肽抗體的雜交瘤細(xì)胞，在小鼠腹水或體外擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得大量融合肽抗體．

Answer 1

分析 1、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行．
2、單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過(guò)三次篩選：①篩選能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞②篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測(cè)：專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞．最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體．

解答 解：（1）①可利用蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列．然后用DNA合成儀合成出目的基因．要獲得大量的目的基因，需要用PCR擴(kuò)增．該技術(shù)的前提是要有 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
②在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要加入牛乳腺蛋白基因啟動(dòng)子，受精卵作為最理想的受體細(xì)胞．
（2）單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，并在特定的培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細(xì)胞，再通過(guò)（多次）克隆化培養(yǎng)和（專(zhuān)一）抗體（陽(yáng)性）檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生融合肽抗體的雜交瘤細(xì)胞．
故答案為：
（1）①應(yīng)有氨基酸序列    DNA合成儀      PCR       一段已知目的基因的核苷酸 ②牛乳腺蛋白基因         受精卵
（2）B（B淋巴）     （多次）克隆化培養(yǎng)和（專(zhuān)一）抗體（陽(yáng)性）檢測(cè)

點(diǎn)評(píng) 本題考查蛋白質(zhì)工程、單克隆抗體的制備的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記蛋白質(zhì)工程的基本途徑和單克隆抗體制備的過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．