Question

5．圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為①②③④．下列操作方法不正確的是（　　）

• A． 平板劃線后培養(yǎng)微生物時要倒置培養(yǎng)
• B． 不能將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連
• C． 劃線操作時，將沾有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基
• D． 在②〜④區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌

Answer 1

分析 平板劃線的操作的基本步驟是：
（一）、右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞．
（二）、左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面．
（三）、燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連．
（四）、將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．

解答 解：A、用平板培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時，為防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基造成干擾或污染，應將平板倒過來放置培養(yǎng)，A正確；
B、劃線時要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)線連．因為最后一區(qū)是細菌最稀少的，而第一區(qū)是細菌最致密的，如果連在一起則有可能影響單個菌落的分離效果，B正確；
C、將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，而不能插入培養(yǎng)基，C錯誤；
D、在①②③④區(qū)域中劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端，D正確．
故選：C．

點評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠掌握平板劃線法操作的基本步驟，明確每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，再結合所學知識準確判斷．