Question

【題目】利用生物工程技術(shù)，可從轉(zhuǎn)基因奶山羊乳汁中分離獲得人凝血因子IV，用于血友病的治療。請回答下列問題：

（1）根據(jù)凝血因子IV基因上游和下游的堿基序列，可用____技術(shù)獲取并擴增基因。構(gòu)建該基因表達載體時，所用到的工具酶是_____，該基因表達載體中，凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分別是________。

（2）將目的基因表達載體導(dǎo)入奶山羊受精卵的常用方法是______。受體細胞選用受精卵的優(yōu)點是細胞大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)含量高和_______。

（3）在體外胚胎培養(yǎng)時，應(yīng)選用囊胚的_____進行DNA分析，用于選擇雌性胚胎。此期的胚胎也適于胚胎分割移植，此技術(shù)的優(yōu)點是________。

（4）人凝血因子IV是一種胞外酶，該蛋白的加工是在______等細胞器上進行的。人凝血因子IV只在乳腺細胞合成的原因是___________________。

Answer 1

【答案】

（1）PCR 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 啟動子和終止子

（2）顯微注射法 細胞全能性高

（3）滋養(yǎng)層細胞 充分發(fā)揮雌性動物的生殖潛力（快速大量繁殖）（1分）

（4）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體（1分） 基因的選擇性表達（1分）

【解析】

試題分析：

（1）可利用 PCR 技術(shù)擴增目的基因；構(gòu)建該基因表達載體時，通常用同種限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體，再用DNA連接酶將目的基因與切開的運載體連接起來，因此所用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶。凝血因子Ⅳ基因為目的基因，在基因表達載體中，啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端。

（2）顯微注射技術(shù)是將目的基因?qū)��?/span>動物細胞常用的方法；受精卵的優(yōu)點是：細胞全能性最高，細胞大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)含量高。

（3）在體外胚胎培養(yǎng)時，可取囊胚的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎分割有利于提高胚胎的利用率，胚胎移植可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。

（4）分泌蛋白是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器上加工的；基因的選擇性表達使人凝血因子Ⅳ只在乳腺細胞合成。