Question

【題目】尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，為探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO47HO	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定溶到1000mL，調(diào)pH為7.2

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是 ，這種培養(yǎng)基從物理性質(zhì)劃分屬于_______培養(yǎng)基。“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的 和 ，為了滿足圖示錐形瓶中目的菌對(duì)氧氣的需求，應(yīng)采用的操作方法是 。

（2）圖中將細(xì)菌（非硝化細(xì)菌）轉(zhuǎn)到培養(yǎng)基上時(shí)，應(yīng)采用 法接種，獲得單個(gè)菌落。初步篩選出來(lái)的菌種，還需要用生化的方法作進(jìn)一步的鑒定：在此培養(yǎng)基中接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若PH （降低/不變/升高），說(shuō)明該菌種能夠分解尿素。

（3）A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有____________(填序號(hào))。

①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基被污染 ③由于操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照。

Answer 1

【答案】（1）篩選目的菌 固體（1分） 尿素 葡萄糖 振蕩培養(yǎng)（或攪拌）

（2）稀釋涂布平板 升高

（3）①②③

【解析】

（1）分析題圖培養(yǎng)基配方可知，此培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，這樣只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源而無(wú)法生長(zhǎng)，起到了篩選能分解尿素的菌的作用．從物理形態(tài)看，培養(yǎng)基配方中含有凝固劑瓊脂，屬于固體培養(yǎng)基．“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的氮源和葡萄糖．為了滿足圖示錐形瓶中液體培養(yǎng)基中目的菌對(duì)氧氣的需求，應(yīng)采用的操作方法是振蕩培養(yǎng)（或攪拌）．

（2）將圖中的液體菌液轉(zhuǎn)移接種到固體培養(yǎng)基上需要使用稀釋涂布平板法接種．接種環(huán)需要進(jìn)行灼燒滅菌．在此培養(yǎng)基中接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩剞D(zhuǎn)化為氨而使pH升高，若PH升高說(shuō)明該菌種能夠分解尿素．

（3）該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染，或者是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行無(wú)菌操作。