綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白位的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。
（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是TGCA，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用限制酶      ，再對          進(jìn)行切割。
（2）若對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒A進(jìn)行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識別位點(diǎn)完全切開，請根據(jù)圖表中的信息分析，若采用BamH1和Pst1酶切，可得到       種DNA片段。
（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可在熒光顯微鏡下觀察GFP的表達(dá)，圖中綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的轉(zhuǎn)基因操作中的GFP既是      也是           。
（4）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中涉及到多項(xiàng)現(xiàn)代生物技術(shù)，圖中⑤⑥⑦過程屬于           技術(shù)，而⑨過程屬于              技術(shù)。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，彎曲的蠶絲由于彎折處容易斷裂，其強(qiáng)度低于由蜘蛛紡績器拖牽絲的直絲，并首次在世界上通過轉(zhuǎn)基因方法將“綠色熒光蛋白基因”和“蜘蛛拖牽絲基因”拼接成功插入蠶絲基因組中，并在受體細(xì)胞中得到成功表達(dá)。

（1）這項(xiàng)基因工程的操作中，目的基因是              ，綠色熒光蛋白基因的主要目的是                                。

（2）在基因工程中，若選出的目的基因共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸有460個，放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代，那么，在擴(kuò)增儀中放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)至少應(yīng)是              個。

（3）若限制性內(nèi)切酶A的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶B的識別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。則限制性內(nèi)切酶A切割質(zhì)粒形成的黏性末端是         ，若在DNA連接酶的作用下，上述兩種限制性內(nèi)切酶切割后形成的黏性末端是否能夠連接             。

（4）下列關(guān)于生物工程中酶的作用的敘述中，錯誤的是（    ）

A．纖維素酶可用于植物體細(xì)胞雜交

B．胰蛋白酶可用于動物細(xì)胞培養(yǎng)

C．限制性內(nèi)切酶只能用于提取目的基因

D．DNA連接酶只能用于DNA的拼接重組

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科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年廣東省連州市連州中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答：

(1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。
(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白
（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程分為三個步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在                    的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                      酶。
(6)以上培育過程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))   

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科目：高中生物 來源：2011屆上海市嘉定區(qū)高三上學(xué)期第一次質(zhì)量調(diào)研生物試卷 題型：綜合題

分析回答有關(guān)生物工程中的問題：（8分）
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖．據(jù)圖回答：

（1）綠色熒光蛋白基因在該實(shí)驗(yàn)中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點(diǎn)是—G’GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程：________________________                                 
 _________。
（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是_______________________。
(4)目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是（用數(shù)字表示）：_______              ___                           。
①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。
(5)在培養(yǎng)重組細(xì)胞時，培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。
(6)以上培育過程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________等（至少答出三項(xiàng)）。

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科目：高中生物 來源：2013屆廣東省連州市高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。據(jù)圖回答：

 (1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。

(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。

(4)目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程分為三個步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在                     的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                       酶。

 (6)以上培育過程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))   

 

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科目：高中生物 來源：2010-2011學(xué)年上海市嘉定區(qū)高三上學(xué)期第一次質(zhì)量調(diào)研生物試卷 題型：綜合題

分析回答有關(guān)生物工程中的問題：（8分）

日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖．據(jù)圖回答：

（1）綠色熒光蛋白基因在該實(shí)驗(yàn)中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點(diǎn)是—G’GATCC—，請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程：________________________                                 

 _________。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是_______________________。

(4)目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是（用數(shù)字表示）：_______              ___                            。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

(5)在培養(yǎng)重組細(xì)胞時，培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。

(6)以上培育過程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________等（至少答出三項(xiàng)）。

 

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