Question

【題目】下圖是某同學(xué)分離和培養(yǎng)洗衣機(jī)中微生物的部分操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖。

（1）圖1所示操作為倒平板，此時(shí)培養(yǎng)基溫度約為______℃，若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)洗衣機(jī)中滋生的細(xì)菌時(shí)，除考慮各種營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮______和滲透壓等條件(至少寫兩個(gè))。

（2）圖2所示接種方法是______，從圖示信息看，操作中存在錯(cuò)誤的步驟是______(用字母表示)。操作過程中，接種環(huán)需要灼燒滅菌的次數(shù)是______次。

（3）將以上接種后的平板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)，需倒置的原因是______。

（4）在檢測(cè)洗衣機(jī)的污垢中是否含微生物時(shí)，也有同學(xué)先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0.1 mL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種接種方法稱為______。培養(yǎng)一段時(shí)間后，該同學(xué)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿中共有57個(gè)菌落(如圖3)，他認(rèn)為0.1 mL菌液中含有的細(xì)菌實(shí)際數(shù)很可能大于57個(gè)，其依據(jù)是______。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，此目的是______。

Answer 1

【答案】50溫度、pH、氧氣、無(wú)菌等平板劃線法C6防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染稀釋涂布平板法疊在一起的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成了一個(gè)菌落防止造成環(huán)境污染

【解析】

平板劃線操作：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅；②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞；③將試管口通過火焰；④將己冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，沾取一環(huán)菌液；⑤將試管口通過火餡，并塞上棉塞；⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基；⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

涂布平板操作：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；②取少量菌液（不超過0.1mL），滴加到培養(yǎng)基表面；③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s；④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。

（1）培養(yǎng)基溫度為50℃，倒平板比較合適。溫度過低時(shí)，瓊脂容易凝固，不利倒平板；溫度過高時(shí)倒平板，會(huì)在培養(yǎng)基表面形成大量冷凝水，影響使用。細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件有：①充足的營(yíng)養(yǎng)；②適宜的溫度；③合適的酸堿度；④必要的氣體環(huán)境；⑤無(wú)菌的條件；⑥適宜的滲透壓等。

（2）圖2所示是平板劃線接種操作示意圖，操作順序是A→B→E→D→C→F。其中操作錯(cuò)誤的步驟是C，該步驟應(yīng)在酒精燈火焰旁操作。平板劃線法中有以下幾種情況需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌。①取菌種前灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上原有微生物。②從第二次開始，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留菌種，使下次劃線的菌種直接來自于上次劃線末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少，達(dá)到分離菌株的目的。③接種結(jié)束后灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。由圖2可知，共在平板劃線5次，因此接種環(huán)需要灼燒滅菌6次。

（3）為了防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，因此將以上接種后的平板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需倒置。

（4）同學(xué)先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0.1 mL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱為稀釋涂布平板法。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起，平板上只觀察到一個(gè)菌落。因此，0.1 mL菌液中含有的細(xì)菌實(shí)際數(shù)很可能大于57個(gè)。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為了避免細(xì)菌污染環(huán)境，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉。