Question

18．微生物與我們的生活密切相關(guān)．分析并回答下列與微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用相關(guān)的問題．
（1）如表是某液體培養(yǎng)基成分含量表．

編號	①	②	③	④	⑤	⑥
成分	NH4HCO3	KH2PO4	CaSO4	FeCl3	維生素	H2O
含量	0.5g	0.3g	0.5g	0.5g	少許	100mL

用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌，其同化作用的類型屬于自養(yǎng)型；此培養(yǎng)液若用來篩選自生固氮菌，則應(yīng)除去的成分是表格中的NH₄HCO₃；若要將該液體培養(yǎng)基配制為固體培養(yǎng)基，則還需加入的物質(zhì)是瓊脂．
（2）檢驗飲用水中大腸桿菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施．
①檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后采用稀釋涂布平板法將不同稀釋度的水樣接種到培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量．如圖所示4種菌落分布圖中，不可能用該方法得到的是D．

②用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設(shè)置對照組．設(shè)置方法是相同條件下直接培養(yǎng)不涂布水樣的空白培養(yǎng)基．
③如分別取0.1mL已稀釋10³倍的水樣分別接種到3個培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為45、56、67，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為5.6×10⁸．
④已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)氣．現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？通過無菌操作向試管中注入一定量的待檢水樣，再注入已經(jīng)滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱24h，若試管內(nèi)有氣泡生成，說明水樣中有大腸桿菌．．

Answer 1

分析 閱讀題干可知，本題主要是微生物培養(yǎng)的條件，包括環(huán)境條件和營養(yǎng)需求，明確知識點后，對相關(guān)知識點進行梳理，然后根據(jù)具體問題進行分析綜合回答．

解答 解：（1）據(jù)表分析，該培養(yǎng)基配方中處維生素外缺少其他的有機碳源與氮源，所以該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌的同化作用的類型屬于自養(yǎng)型．此培養(yǎng)液若用來篩選自生固氮菌，則應(yīng)除去的成分是表格中的氮源，即NH₄HCO₃．要將該液體培養(yǎng)基配制為固體培養(yǎng)基，則還需加入凝固劑瓊脂．
（2）①檢驗含有大腸桿菌的水樣通常需要使用稀釋涂布平板法將不同稀釋度的水樣接種到培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量．據(jù)圖分析，ABC屬于稀釋涂布平板法接種的結(jié)果，D屬于平板劃線法接種的結(jié)果，所以圖示4種菌落分布圖中，不可能用該方法得到的是D．
②該實驗的空白對照實驗為：相同條件下直接培養(yǎng)不涂布水樣的空白培養(yǎng)基．
③每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為（45+56+67）÷3÷0.1×1000×10³=5.6×10⁸．
④待檢水樣中是否含有大腸桿菌的檢測方法為：通過無菌操作向試管中注入一定量的待檢水樣，再注入已經(jīng)滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱24h，若試管內(nèi)有氣泡生成，說明水樣中有大腸桿菌．
故答案為：
（1）自養(yǎng)型   NH₄HCO₃ 瓊脂
（2）①稀釋涂布平板   D
②相同條件下直接培養(yǎng)不涂布水樣的空白培養(yǎng)基
③5.6×10⁸
④通過無菌操作向試管中注入一定量的待檢水樣，再注入已經(jīng)滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱24h，若試管內(nèi)有氣泡生成，說明水樣中有大腸桿菌．

點評 本題的知識點是，選擇培養(yǎng)基、微生物培養(yǎng)的環(huán)境條件，微生物培養(yǎng)的營養(yǎng)條件．主要考查學生分析實驗結(jié)果獲取有效信息，并分析利用有效信息獲取結(jié)論的能力．