Question

【題目】為了更快的提高綿羊生產(chǎn)效率和羊肉品質(zhì)，國(guó)內(nèi)某工廠引進(jìn)德國(guó)美利奴羊，并嘗試以美利奴羊?yàn)檠芯繉?duì)象設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究亞麻酸在胚胎工程中的作用。請(qǐng)分析回答：

①卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：選用美利奴羊純種母羊作為供體，注射促卵泡生成素（FSH）以及促黃體生成素（LH），然后收集并處理卵母細(xì)胞，隨機(jī)分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22～24h。在顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞，判斷是否成熟，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1。

②精子的采集：選用該種羊場(chǎng)飼養(yǎng)的東北半細(xì)毛羊公羊獲得精子，并利用適宜濃度的肝素進(jìn)行處理。

③體外受精：在獲能溶液中完成受精過程后，用顯微鏡觀察。

④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44～48h后檢查分裂情況，每隔48h更換一次培養(yǎng)液，第5～9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表2。

表1亞麻酸對(duì)綿羊卵母細(xì)胞體外成熟的影響

ALA濃度/umol●L-1	卵時(shí)細(xì)胞數(shù)	核成熟卵子數(shù)
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	188
200	215	135

表2亞麻酸對(duì)綿羊 早期胚胎發(fā)育的影響

ALA濃度/umol●L-1.	培養(yǎng)卵數(shù)	囊胚數(shù)
0	309	75
10	325.	82
50	292.	97
100	310	127
200	231	68

（1）步驟①注射FSH和LH的目的是____________，步驟②使用肝素的目的是__________。

（2）步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是________，如需對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定，可取囊胚期的__________。

（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1 時(shí)，對(duì)綿羊卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育起__________作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，__________μmol·L-1 的亞麻酸對(duì)綿羊卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是__________。

Answer 1

【答案】誘導(dǎo)羊進(jìn)行超數(shù)排卵 使精子獲能 在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個(gè)極體 滋養(yǎng)層細(xì)胞 促進(jìn) 100 核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例最高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例最高

【解析】

1、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。（2）精子的采集和獲能①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫�溶液中完成受精過程。
2、分析表格：亞麻酸溶液為0μmol·L-1的一組為對(duì)照組，其他為實(shí)驗(yàn)組。與對(duì)照組相比“核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例”和“囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例”即可判斷該濃度的作用是促進(jìn)還是抑制。

（1）根據(jù)題干信息“注射促卵泡生成素（FSH）以及促黃體生成素（LH），然后收集并處理卵母細(xì)胞”可知，步驟①注射FSH和LH的目的是誘導(dǎo)羊進(jìn)行超數(shù)排卵；精子采集后需要進(jìn)行獲能處理，因此步驟②使用肝素的目的是使精子獲能。
（2）判斷是否受精的依據(jù)是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個(gè)極體；對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，可取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析來鑒定性別。
（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1時(shí)，核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例以及囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例都比對(duì)照組高，這說明該濃度的亞麻酸溶液對(duì)綿羊卵母細(xì)胞體外成熟和胚發(fā)育起促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，亞麻酸溶液為100μmol·L-1時(shí)，核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例最高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例最高，說明該濃度的亞麻酸溶液對(duì)綿羊卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利。