Question

17．綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細胞和組織內(nèi)基因表達及蛋白質(zhì)位置的理想標記．請根據(jù)圖表回答下列問題．
（1）已知GFP是從水母的體細胞中提取出的一種基因，提取它時通常利用的酶是限制性內(nèi)切酶．
（2）若將含GFP的重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞，則常用的方法是顯微注射技術(shù)．
（3）欲進一步將已導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細胞培養(yǎng)成帶有綠色熒光蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因豬，還需利用細胞核移植（或體細胞核移植）技術(shù)，將導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細胞的細胞核移植到去核的豬的卵母細胞中，從而形成重組細胞，再進一步培養(yǎng)成早期胚胎，通過胚胎移植技術(shù)轉(zhuǎn)移到豬的子宮中，從而得到綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬．
（4）不同種生物之間的基因移植成功，從分子水平分析，說明了生物共用一套遺傳密碼（或密碼子）．
（5）科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法將該基因?qū)�入金茶花葉片細胞的染色體DNA上，經(jīng)培養(yǎng)長成的植株具備了抗病性，這說明目的基因（或抗枯萎病基因）已表達．如果把該基因?qū)�入葉綠體DNA中，將來產(chǎn)生的配子中不一定（選填“一定”或“不一定”）含有抗病基因．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取目的基因時通常利用限制酶．
（2）將目的基因?qū)�入動物細胞常用顯微注射法．
（3）動物體細胞核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎再經(jīng)胚胎移植到受體子宮中，最終發(fā)育為克隆動物．
（4）由于自然界中所有生物共用一套遺傳密碼子，因此不同種生物之間的基因移植能成功．
（5）科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法將該基因?qū)�入金茶花葉片細胞的染色體DNA上，經(jīng)培養(yǎng)長成的植株具備了抗病性，這說明目的基因（或抗枯萎病基因）已表達．葉綠體中基因的遺傳屬于細胞質(zhì)遺傳，因此把該基因?qū)�入葉綠體DNA中，將來產(chǎn)生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案為：
（1）限制性內(nèi)切酶
（2）顯微注射技術(shù)
（3）細胞核移植（或體細胞核移植）胚胎移植
（4）遺傳密碼（或密碼子）
（5）目的基因（或抗枯萎病基因）已表達

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．