Question

【題目】在盛產(chǎn)柿子的某地，生物小組開(kāi)展柿子酒、柿子醋生產(chǎn)的相關(guān)活動(dòng)。

(1)土壤中的酵母菌計(jì)數(shù)：

在秋季的柿子園中，落地柿子流出的果汁的周圍土壤中有酵母菌大量生長(zhǎng)繁殖。

①用滅過(guò)菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在__________旁稱取l0g土樣，加入盛有90 mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。而后進(jìn)行系列稀釋操作：吸取錐形瓶中土壤液的上清液__________ mL，轉(zhuǎn)移至盛有9mL無(wú)菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液。

②為測(cè)定土壤中酵母菌的數(shù)量，選用第①步中所獲得的102、103、104倍的土壤液的稀釋液，并依次分別吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布操作。在適宜條件下培養(yǎng)，當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，對(duì)各稀釋度涂布的三個(gè)平板進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)（如下表）。

則每克土壤樣品中的酵母菌數(shù)量約為____個(gè)。要使該實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)可靠，還應(yīng)該實(shí)施的操作是____ 。

(2)柿子醋生產(chǎn)菌的制備：

為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內(nèi)的菌膜于____C進(jìn)行純化培養(yǎng)，獲得下圖所示菌落分布。應(yīng)從____（填“甲”、“乙”或“丙”）區(qū)域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種。

(3)柿子酒、柿子醋的制作（發(fā)酵裝置如上圖所示）：

①排氣口彎管設(shè)置的目的是________________________________。

②柿子醋可在柿子酒生產(chǎn)的基礎(chǔ)上改變__________進(jìn)行生產(chǎn)。

Answer 1

【答案】 火焰 1 1.75×107 同時(shí)在各稀釋度組中，另加一個(gè)平板接種無(wú)菌水作為對(duì)照 3035 丙 在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出CO2，防止空氣中微生物的污染 菌種和環(huán)境條件

【解析】（1）①為了避免微生物的污染，用滅過(guò)菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在火焰旁稱取10g土樣，加入盛有90ml無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。而后進(jìn)行系列稀釋操作：吸取錐形瓶中土壤液的上清液1ml，轉(zhuǎn)移至盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液。

②由于一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此選擇“稀釋度103倍”進(jìn)行計(jì)算，每克土壤樣品中的酵母菌數(shù)量約=（178+191+156）÷3÷0.1×103×102÷10=1.75×107個(gè)。要使該實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)可靠，還應(yīng)該實(shí)施的操作是同時(shí)在各稀釋度組中，另加一個(gè)平板接種無(wú)菌水作為對(duì)照。

（2）酵母菌適宜生存的溫度為18～25℃，為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內(nèi)的菌膜（醋酸菌）于3035℃進(jìn)行純化培養(yǎng)，獲得圖1所示菌落分布。丙中已形成單個(gè)菌落，因此需要從丙區(qū)域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種。

（3）①排氣口彎管設(shè)置的目的是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出C02，防止空氣中微生物的污染。

②可通過(guò)裝置中的出料口對(duì)發(fā)酵情況進(jìn)行及時(shí)監(jiān)測(cè)．此時(shí)，若采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)發(fā)酵液的酵母菌觀察計(jì)數(shù)，與（1）中計(jì)數(shù)方法相比，該計(jì)數(shù)方法測(cè)得的酵母菌數(shù)目較多。

③柿子醋可在柿子酒生產(chǎn)的基礎(chǔ)上改變菌種和環(huán)境條件進(jìn)行生產(chǎn)，即菌種由酵母菌改為醋酸菌，環(huán)境條件由無(wú)氧、18～25℃改為通入氧氣、30～35℃。