23．圖9中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖甲、圖乙中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。下列敘述正確的是    (    )

  A．用質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma I切割

  B．圖甲所示的質粒分子在經(jīng)Sma I酶切割后含有4個游離的磷酸基團

　C．為獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入DNA聚合酶

  D．用EcoR I、HindⅢ和BamH I中的任意一種酶切割質粒和外源基因都可以

【答案】A

【解析】  質粒切割前是雙鏈環(huán)狀DNA分子，所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團。從圖1可以看出，質粒上只含有一個SmaⅠ的切點，因此被改酶切割后，質粒變?yōu)榫�性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團；質粒和目的基因連接后獲得重組質粒，該過程需要連接酶作用，故混合后加入DNA連接酶。 只使用EcoR I，則質粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時，會產(chǎn)生質粒和目的基因自身連接物，而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切時，質粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時，不會產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源：2011－－2012學年浙江北侖中學度第一學期八校聯(lián)考高三生物試卷 題型：綜合題

（每空1分，共9分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖l、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）一個圖1所示的質粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割后有       個游離的磷酸基團，若用EcoR I切割圖2所示外源DNA，可得     個DNA片段。
（2）若對圖中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越       ，原因是                                    。
（3）用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是          。
（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止                                 。
（5）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入       酶。
（6）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了                             。
（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在                                的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。

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科目：高中生物 來源：2011－－2012學年浙江北侖中學度第一學期八校聯(lián)考高三生物試卷 題型：綜合題

（每空1分，共9分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖l、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）一個圖1所示的質粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割后有        個游離的磷酸基團，若用EcoR I切割圖2所示外源DNA，可得      個DNA片段。

 （2）若對圖中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越        ，原因是                                     。

 （3）用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是           。

（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止                                  。

 （5）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入        酶。

 （6）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了                              。

（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在                                 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。

 

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