Question

下面是一項(xiàng)“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請(qǐng)回答：

本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計(jì)所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段拼接而成，并且在胰島素COOH端加上KDEL內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細(xì)胞中的降解。將該基因置于CaMV 35S啟動(dòng)子和果實(shí)專一性啟動(dòng)子2A12的驅(qū)動(dòng)之下通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實(shí)中表達(dá)人胰島素。

(1)本專利是采用__________方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，原因是__________________________________。

要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用____________技術(shù)。

(2)根據(jù)上述摘要，轉(zhuǎn)基因操作時(shí)所用的載體是__________。構(gòu)建的基因表達(dá)載體中不會(huì)含有__________(從下列選項(xiàng)中選擇)。

①目的基因　　　　　　　　②CaMV 35S啟動(dòng)子

③果實(shí)專一性啟動(dòng)子2A12   ④引物

⑤標(biāo)記基因                ⑥內(nèi)含子滯留序列

⑦終止密碼子              ⑧終止子

(3)如果要檢測(cè)在受體細(xì)胞中是否存在目的基因可采用______________技術(shù)。該技術(shù)中使用的基因探針也可以用來檢測(cè)__________。

Answer 1

【解析】　本題考查基因工程的知識(shí)。由題意可知，所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計(jì)所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段拼接而成，所以本專利是采用人工合成方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，原因是密碼子具有簡(jiǎn)并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同�；�因表達(dá)載體組分比較多，主要是以下幾個(gè)：目的基因、CaMV 35S啟動(dòng)子、果實(shí)專一性啟動(dòng)子2A  12 標(biāo)記基因。如果要檢測(cè)在受體細(xì)胞中是否存在目的基因可采用DNA分子雜交技術(shù)。該技術(shù)中使用的基因探針也可以用來檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。

【答案】　(1)人工合成　密碼子具有簡(jiǎn)并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同　PCR

(2)農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)�！、堍蔻�

(3)DNA分子雜交　目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA