Question

1．現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請(qǐng)回答問題．

（1）①過程表示逆轉(zhuǎn)錄，②過程用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，它的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)，尾端必須有終止子，標(biāo)記基因的作用為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來，③過程常用的方法是顯微注射法，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因．
（3）從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用的方法抗原-抗體雜交
（4）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的抗原蛋白作為疫苗．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)．
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體．

解答 解：（1）圖中①過程箭頭從RNA指向DNA，為逆轉(zhuǎn)錄過程，提取目的基因時(shí)需要用到限制酶．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，尾端必須有終止子，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)；還要具備標(biāo)記基因，用于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．圖中的③為目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞，最常用的方法是顯微注射法；目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因．
（3）從分子水平上鑒定目的基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA，采用的方法是分子雜交技術(shù)；對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才能獲得足量所需要的細(xì)胞．
（4）疫苗為毒性弱的抗原，因此要預(yù)防H7N9禽流感，可以用圖中的抗原蛋白作為疫苗．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）
（2）啟動(dòng)子      RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)   終止子   為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來   顯微注射法   轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因
（3）分子雜交  抗原-抗體雜交
（4）抗原蛋白

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和單克隆抗體的制備有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．