Question

【題目】閱讀下列有關(guān)病毒的材料并回答題目。

Ⅰ．2019新型冠狀病毒，即“2019-nCoV”，為有包膜病毒。顆粒呈圓形或橢圓形，直徑50～200nm。顆粒表面有棒狀突起，使病毒表面看起來形如花冠，故而得名。2019-nCoV基因組長度為29．8Kb，為單股正鏈RNA，其5’端為甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）結(jié)構(gòu)，可直接作為翻譯模板。截至2020年3月25日上午10時(shí)，世界范圍確診感染此病毒的人數(shù)已累計(jì)達(dá)到412461人。

（1）下列選項(xiàng)錯(cuò)誤的是_____

A．細(xì)胞膜能控制物質(zhì)進(jìn)出，故該病毒只能侵染受損細(xì)胞，使人患病

B．由于沒有核糖體，這種病毒無法合成蛋白質(zhì)，其包膜組成一定不含蛋白質(zhì)

C．病毒的遺傳物質(zhì)水解后可產(chǎn)生一分子核苷，一分子含氮堿基與一分子磷酸

D．此病毒的單股正鏈RNA，只有轉(zhuǎn)錄形成對(duì)應(yīng)的負(fù)鏈RNA才能附著在細(xì)胞的核糖體上

（2）這種病毒的遺傳物質(zhì)為_____，研究人員緊急研發(fā)了核酸檢測試劑盒，以此來檢測病毒，檢測此病毒的核酸可使用_______法。研究人員發(fā)現(xiàn)，病毒的中間宿主為蝙蝠，某些情況下，病毒可在不同動(dòng)物身體內(nèi)翻譯出基本相同的多肽鏈，這是因?yàn)?/span>_____。

（3）病毒入侵人體后，引起相關(guān)細(xì)胞分泌抗體，該抗體并不會(huì)與其他病癥的抗原結(jié)合，這體現(xiàn)了________，此原理也可應(yīng)用于該病的檢測。若要用細(xì)胞工程的方法生產(chǎn)針對(duì)2019-nCoV上抗原的單克隆抗體，用到的技術(shù)有_________和_________。

（4）將2019-nCoV不穩(wěn)定的RNA轉(zhuǎn)換成DNA后，技術(shù)人員常采用熒光定量PCR技術(shù)定量檢測樣本中病毒的核酸含量。其原理如圖：在PCR反應(yīng)體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)，加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)_________催化子鏈延伸至探針處，會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接受到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與PCR起始狀態(tài)_________含量呈正相關(guān)。

Ⅱ．朊病毒是一種只含蛋白質(zhì)而不含核酸的病原微生物。按圖示1→2→3→4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證朊病毒侵染因子是蛋白質(zhì)，題中所用牛腦組織細(xì)胞為無任何標(biāo)記的活體細(xì)胞。

（1）本實(shí)驗(yàn)采用的研究方法是______。

（2）從理論上講，經(jīng)1→2→3→4實(shí)驗(yàn)離心后上清液中______（填“能大量”或“幾乎不能”）檢測到32P，沉淀物中___________（填“能大量”或“幾乎不能”）檢測到32P，出現(xiàn)上述結(jié)果的原因是：_________。

（3）如果添加試管5，從試管2中提取朊病毒后先加入試管5同時(shí)添加35S標(biāo)記的（NH4）235SO4，連續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間后，再提取朊病毒加入試管3，培養(yǎng)適宜時(shí)間后離心，檢測放射性應(yīng)主要位于_______中，少量位于_______中，原因是：_____________。

（4）一般病毒的增殖同朊病毒之間的最主要區(qū)別是：一般的病毒侵染細(xì)胞是向宿主細(xì)胞提供________（物質(zhì)），利用宿主細(xì)胞的_______________等物質(zhì)進(jìn)行增殖。

Answer 1

【答案】ABCD RNA 分子雜交 （幾乎）所有生物共用一套密碼子 抗體具有特異性 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合 Taq酶 模板DNA 同位素標(biāo)記法 幾乎不能 幾乎不能 朊病毒不含核酸只含蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)中磷含量極低，故試管2中提取的朊病毒幾乎不含32P 沉淀物 上清液 被35S標(biāo)記的朊病毒（蛋白質(zhì)），大部分進(jìn)入牛腦組織細(xì)胞中，只有少量的朊病毒可能沒侵入牛腦組織細(xì)胞 核酸 核苷酸和氨基酸

【解析】

1、病毒不具有獨(dú)立代謝能力，只能寄生在活細(xì)胞中。據(jù)遺傳物質(zhì)不同，可分為DNA病毒和RNA病毒。2019-nCoV的核酸為單股正鏈RNA，其5’端為甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）結(jié)構(gòu)，可直接作為翻譯模板。

2、朊病毒不能獨(dú)立生活，在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖，所以要標(biāo)記朊病毒需先培養(yǎng)帶標(biāo)記的宿主細(xì)胞—牛腦組織細(xì)胞，再讓朊病毒侵染帶標(biāo)記的牛腦組織細(xì)胞，完成對(duì)朊病毒的標(biāo)記。因?yàn)殡貌《緵]有核酸，只有蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)中磷含量極低，故離心后上清液和沉淀物中都幾乎不含32P；用35S標(biāo)記的朊病毒侵入牛腦組織細(xì)胞，由于少量朊病毒不能侵染成功，所以放射性物質(zhì)主要位于沉淀物中，上清液中含少量放射性物質(zhì)。朊病毒是一類非正常的病毒，它不含有通常病毒所含有的核酸。

Ⅰ（1）A、細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的作用是相對(duì)的，2019-nCoV表面的刺突糖蛋白能與人體細(xì)胞表面ACE2 受體蛋白特異性結(jié)合，從而侵染細(xì)胞，2019-nCoV并不是只能侵染受損細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B、病毒沒有核糖體，利用宿主細(xì)胞的核糖體合成蛋白質(zhì)，2019-nCoV的包膜成分中含有蛋白質(zhì)，其刺突糖蛋白能識(shí)別人體細(xì)胞膜上的受體，B錯(cuò)誤；

C、2019-nCoV的核酸為單股正鏈RNA，即遺傳物質(zhì)為RNA，初步水解可形成四種核糖核苷酸，徹底水解可形成核糖、磷酸和四種含氮堿基，C錯(cuò)誤；

D、由題意可知，此病毒的單股正鏈RNA，可直接作為翻譯模板，所以可直接附著在宿主細(xì)胞的核糖體上進(jìn)行翻譯，不需要轉(zhuǎn)錄形成對(duì)應(yīng)的負(fù)鏈RNA，D錯(cuò)誤。

故選ABCD。

（2）這種病毒只含RNA，故遺傳物質(zhì)為RNA。利用試劑盒檢測病毒所利用的是分子雜交技術(shù)，其原理為堿基互補(bǔ)配對(duì)原則；因?yàn)椋◣缀酰┧�有生物共用一套密碼子，所以病毒可在不同動(dòng)物身體內(nèi)翻譯出基本相同的多肽鏈。

（3）抗體具有特異性，一種抗體只能和一種抗原發(fā)生特異性結(jié)合。單克隆抗體的制備過程中，需要將經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)并篩選后獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，并將該雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得單克隆抗體，所以該過程用到的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合。

（4）PCR技術(shù)中延伸DNA子鏈的酶為Taq酶。題干中提出“加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針”，并且“每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成”，因此反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)。

Ⅱ（1）由圖可知，本實(shí)驗(yàn)采用了同位素標(biāo)記法。
（2）由于朊病毒不含核酸只含蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)中磷含量極低，故試管2中提取的朊病毒幾乎不含32P。因此，從理論上講，離心后上清液中幾乎不能檢測到32P，沉淀物中幾乎不能檢測到32P。
（3）經(jīng)試管5中牛腦組織細(xì)胞培養(yǎng)出的朊病毒（蛋白質(zhì)）被35S標(biāo)記，提取后加入試管3中，35S隨朊病毒侵入到牛腦組織細(xì)胞中，因此放射性物質(zhì)主要位于沉淀物中。同時(shí)會(huì)有少量的朊病毒不能成功侵入牛腦組織細(xì)胞，離心后位于上清液中，因此上清液中含少量放射性物質(zhì)。
（4）一般病毒同朊病毒之間的最主要區(qū)別是：一般病毒侵入細(xì)胞是向宿主細(xì)胞提供核酸，利用宿主細(xì)胞的核苷酸和氨基酸合成自身的核酸和蛋白質(zhì)。