Question

下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。

據(jù)圖回答：

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用________限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后再在含________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是________(填字母代號(hào))。

A．啟動(dòng)子　　　　　　　　　B．tetR

C．復(fù)制原點(diǎn) D．a(chǎn)mpR

(3)過(guò)程①可采用的操作方法是________(填字母代號(hào))。

A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化

C．顯微注射 D．細(xì)胞融合

(4)對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的________性。

(5)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用________(填字母代號(hào))技術(shù)。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析

C．抗原—抗體雜交 D．PCR

 

Answer 1

(1)HindⅢ和BamHⅠ　氨芐青霉素 四環(huán)素

(2)A　(3)C　(4)

(5)全能　(6)C

【解析】

試題分析：

（1）由圖可知目的基因和質(zhì)粒上都有BamHI和HindIII酶切位點(diǎn)，因此應(yīng)用它們切割，切割后需要將目的基因和運(yùn)載體用DNA連接酶進(jìn)行連接；因?yàn)樵撡|(zhì)粒上有抗氨芐青霉素的抗性標(biāo)記基因，四環(huán)素抗性基因被破壞，因此應(yīng)先放在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，然后放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以便篩選。

（2）基因的表達(dá)主要是轉(zhuǎn)錄和翻譯，啟動(dòng)子是驅(qū)動(dòng)基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的，故應(yīng)是A。

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將重組載體導(dǎo)入到植物中常用的方法，故A錯(cuò)誤；大腸桿菌轉(zhuǎn)化法是導(dǎo)入到微生物細(xì)胞常用的方法，故B錯(cuò)誤；因?yàn)槭且獙?dǎo)入到動(dòng)物細(xì)胞中，故最常用顯微注射法，故C正確；細(xì)胞融合技術(shù)不能把外源基因?qū)�入受體細(xì)胞中。

（4）早期胚胎分割后能得到多個(gè)基因型相同的個(gè)體，利用了細(xì)胞的全能性。

（5）檢測(cè)蛋白是否表達(dá)，也就是檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，可以用抗原抗體雜交的方法，故C正確。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。