綠色熒光蛋白GFP能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）若限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—，在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)，在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來__________，理由是： ___________________________________________。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是______________________。

（3）獲得轉(zhuǎn)基因豬的關(guān)鍵步驟是_____（填序號(hào)），GFP基因的作用是作為_______。抑制小豬抗原表達(dá)的基因要插入到啟動(dòng)子和_________之間。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免     _____________________。

（4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：_____________________（用數(shù)字表示）。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）  

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

（1）可以連接(1分) 因?yàn)橛蓛煞N不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補(bǔ)的）

（2）顯微注射技術(shù)

（3）②     作為標(biāo)記基因     終止子      器官移植時(shí)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

（4）②①③④

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

綠色熒光蛋白(GFP)是由GFP基因表達(dá)的一種能在紫外線照射下發(fā)出綠色熒光的蛋白質(zhì)，它首先在水母中發(fā)現(xiàn)。如圖為培育綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬的流程圖，此豬的獲得，運(yùn)用了哪些技術(shù)

①轉(zhuǎn)基因技術(shù)②核移植技術(shù)③早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)④胚胎移植技術(shù)等⑤顯微注射技術(shù)⑥胚胎分割技術(shù)

A．①②③④⑥   B．①②④⑤⑥   C．①②③④⑤   D．①②③④⑤⑥

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科目：高中生物 來源：2012屆浙江省金華一中高三上學(xué)期期中考試生物試卷 題型：綜合題

(6分)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白(GFP)會(huì)發(fā)出綠色熒光，可借助熒光跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程：
請根據(jù)上述材料回答下列問題：

(1)在某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光。由此可知（  ）

A．該生物的基因型是雜合的
B．該生物與水母有很近的親緣關(guān)系
C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)
D．改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對，就不能檢測到綠色熒光
(2) 在培育綠色熒光小鼠的過程中，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是核心。完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、________、終止子和啟動(dòng)子等部分。
(3) 上圖操作流程中用到的工具酶有________。
(4) 為迅速增加綠色熒光小鼠的數(shù)量，可采用胚胎工程技術(shù)有超數(shù)排卵受精，               、             。

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科目：高中生物 來源：2010年廣東省汕頭市金山中學(xué)高二下學(xué)期期中試題生物卷 題型：綜合題

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：

（1）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。若限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC一。在質(zhì)粒上有酶I的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
①請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來? ＿＿＿＿＿。理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）GFP基因與目的基因一起構(gòu)建到載體上不影響目的基因的表達(dá)，也不影響由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,且對細(xì)胞無毒性作用，因此GFP基因可以運(yùn)用作為基因表達(dá)載體上的＿＿＿＿＿＿。
（3）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。然后還要通過＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上。
（4）為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞，可通過對母豬注射＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通過顯微操作將其細(xì)胞核去除。
（5）早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等物質(zhì)。
（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程屬于＿＿＿＿＿＿生殖。目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：＿＿＿＿＿＿(用數(shù)字表示)。
①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

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科目：高中生物 來源：2010年廣東省汕頭市高二下學(xué)期期中試題生物卷 題型：綜合題

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：

（1）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。若限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC一。在質(zhì)粒上有酶I的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。

①請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。

 

 

②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來? ＿＿＿＿＿。理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）GFP基因與目的基因一起構(gòu)建到載體上不影響目的基因的表達(dá)，也不影響由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,且對細(xì)胞無毒性作用，因此GFP基因可以運(yùn)用作為基因表達(dá)載體上的＿＿＿＿＿＿。

（3）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。然后還要通過＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上。

（4）為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞，可通過對母豬注射＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通過顯微操作將其細(xì)胞核去除。

（5）早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等物質(zhì)。

（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程屬于＿＿＿＿＿＿生殖。目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：＿＿＿＿＿＿(用數(shù)字表示)。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

 

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