Question

5．下列是有關血紅蛋白的提取與分離的問題，請回答：
（1）凝膠色譜法，是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法．所用的凝膠實際上是一些微小的多孔球體．
（2）實驗前取新鮮的血液，切記要預先加入檸檬酸鈉，加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固．蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中，首先要用生理鹽水（填寫溶液名稱）洗滌紅細胞，其目的是去除雜蛋白．
（3）在蒸餾水和甲苯的作用下，紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白．用（高速）離心法可分離出血紅蛋白．
（4）取血紅蛋白溶液裝入透析袋，再將透析袋放入pH為7.0的（磷酸）緩沖液中，透析12h透析的目的是去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)．透析的原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（5）人們用雞的紅細胞提取DNA，用人的紅細胞提取血紅蛋白，其原因是雞紅細胞具有細胞核，含有DNA，適合用于提取DNA；人紅細胞無細胞核，且血紅蛋白含量豐富，適合用于提取血紅蛋白．

Answer 1

分析 血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：
（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白．
（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析．
（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)．
（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳．

解答 解：（1）凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法．所用的凝膠實際上是一些微小的多孔球體．
（2）實驗前取新鮮的血液，要預先加入檸檬酸鈉防止血液凝固．蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中，首先要用生理鹽水洗滌紅細胞，其目的是去除雜蛋白．
（3）在蒸餾水和甲苯的作用下，紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白．用（高速）離心法可分離出血紅蛋白．
（4）取血紅蛋白溶液裝入透析袋，再將透析袋放入pH為7.0的 （磷酸）緩沖液中，透析12h透析的目的是去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)．透析的原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（5）雞紅細胞具有細胞核，含有DNA，適合用于提取DNA；人紅細胞無細胞核，且血紅蛋白含量豐富，適合用于提取血紅蛋白．
故答案為：
（1）相對分子質(zhì)量大小    微小的多孔球體 
 （2）防止血液凝固      生理鹽水    雜蛋白  
（3）蒸餾水和甲苯    （高速）離心  
（4）（磷酸）緩沖液     去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)    透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)
（5）雞紅細胞具有細胞核，含有DNA，適合用于提取DNA；人紅細胞無細胞核，且血紅蛋白含量豐富，適合用于提取血紅蛋白

點評 本題考查血紅蛋白的提取和分離，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗步驟等，需要考生在平時的學習過程中注意積累．