營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不論在生產(chǎn)實(shí)踐還是科學(xué)實(shí)驗(yàn)中都有重要的意義。營(yíng)養(yǎng)缺陷型是一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如氨基酸、維生素和堿基等)的合成能力上出現(xiàn)缺陷的菌株。能滿(mǎn)足某一菌種野生型(變異前)菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的培養(yǎng)基,稱(chēng)為基本培養(yǎng)基。營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株必須在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的一種或幾種營(yíng)養(yǎng)成分才能正常生長(zhǎng),這種培養(yǎng)基稱(chēng)為補(bǔ)充培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基中加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類(lèi)的天然物質(zhì)(如蛋白胨、酵母膏等),可以滿(mǎn)足該微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型的生長(zhǎng),這種培養(yǎng)基稱(chēng)為完全培養(yǎng)基。野生型產(chǎn)氨短桿菌能利用糖及無(wú)機(jī)鹽經(jīng)一系列酶促代謝反應(yīng)合成腺嘌呤(或腺苷酸),然后再合成菌體所需的核酸等物質(zhì)。示意圖如下:
1、一般可通過(guò)誘變方法獲得腺嘌呤缺陷型菌株,方法為_(kāi)_______。
2、將誘變處理后的存活個(gè)體培養(yǎng)在含有青霉素的________(基本/補(bǔ)充/完全)培養(yǎng)基中,可以淘汰大部分野生型菌株而“濃縮”缺陷型菌株,其原理是________。該培養(yǎng)基也可稱(chēng)為_(kāi)_______培養(yǎng)基。
3、將上述方法處理后的菌株培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基(A)上,經(jīng)培養(yǎng)長(zhǎng)出菌落a、b、c,用滅菌絲絨“印章”輕按A表面,然后將其輕按在含有基本培養(yǎng)基(B)的培養(yǎng)皿上并培養(yǎng)。如下圖所示,( 。┦菭I(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。如要進(jìn)一步確定是腺嘌呤缺陷型,操作的方法是________,結(jié)果________的菌株是腺嘌呤缺陷型。
4、上述過(guò)程可歸納為_(kāi)_______幾個(gè)環(huán)節(jié)。
5、腺嘌呤缺陷型須在基本培養(yǎng)基中供給琥珀酸腺苷酸才能生長(zhǎng),說(shuō)明誘變導(dǎo)致________。由此可見(jiàn),腺嘌呤缺陷型菌株的發(fā)酵可用于生產(chǎn)(物質(zhì))________。
1、用紫外線(xiàn)、化學(xué)試劑等處理野生型菌株 2、基本 青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,野生型細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖活躍,合成細(xì)胞壁受阻而被殺死,缺陷型細(xì)菌處于休止?fàn)顟B(tài)不進(jìn)行細(xì)胞壁的合成 選擇 3、b “印章”除了按在在基本培養(yǎng)基上,另按在補(bǔ)充培養(yǎng)基上,即在基本培養(yǎng)基中加腺嘌呤的培養(yǎng)基(挑取b涂布于腺嘌呤補(bǔ)充培養(yǎng)基上) 完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng),基本培養(yǎng)基上不生長(zhǎng),補(bǔ)充培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 4、誘變 淘汰野生型(選擇) 檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型、鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型 5、催化肌苷酸合成琥珀酸腺苷酸的酶(酶2)喪失 肌苷酸 |
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