Question

12．在藥品生產中，有些藥品如干擾素，白細胞介素，凝血因子等，以前主要是從生物體的組織、細胞或血液中提取的，由于受原料來源限制，價價十分昂貴，而且產量低，臨床供應明顯不足．自70年代遺傳工程發(fā)展起來以后，人們逐步地在人體內發(fā)現(xiàn)了相應的目的基因，使之與質粒形成重組DNA，并以重組DNA引入大腸桿菌，最后利用這些工程菌，可以高效率地生產出上述各種高質量低成本的藥品，請分析回答：
（1）進行基因工程的基本操作一般要經過的四個步驟是：獲取目的基因、構建表達載體、導入受體細胞、目的基因檢測與鑒定．
（2）在基因工程中，質粒是一種最常用的基因的運載體，它廣泛地存在于細菌細胞中，是一種很小的環(huán)狀DNA分子．
（3）在用目的基因與質粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是限制性內切酶和DNA連接酶．
（4）將含有“某激素基因”的質粒導入細菌細胞后，能在細菌細胞內直接合成“某激素”，則該激素在細菌體內的合成包括轉錄和翻譯兩個階段．
（5）在將質粒導入細菌時，一般要用氯化鈣處理細菌，以增大細菌細胞壁的通透性．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟是：獲取目的基因、構建表達載體、導入受體細胞、目的基因檢測與鑒定．
（2）在基因工程中，質粒是一種最常用的基因的運載體，它廣泛地存在于細菌細胞中，是一種很小的環(huán)狀DNA分子．
（3）在用目的基因與質粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是：基因的“剪刀”--限制酶（限制性核酸內切酶）和基因的“針線”--DNA連接酶．
（4）由于“某激素”的化學本質是蛋白質，所以“某激素基因”在細菌體內控制合成“某激素”的過程包括轉錄和翻譯兩個階段．
（5）在將質粒導入細菌時，一般要用氯化鈣處理細菌，以增大細菌細胞壁的通透性．
故答案為：
（1）構建表達載體   目的基因檢測與鑒定 
（2）基因的運載體      DNA
（3）限制性內切酶   DNA連接酶   
（4）轉錄   翻譯
（5）氯化鈣  細菌細胞壁的通透性

點評 本題考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理，掌握基因工程的具體操作步驟及各步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．