Question

12．在藥品生產(chǎn)中，有些藥品如干擾素，白細(xì)胞介素，凝血因子等，以前主要是從生物體的組織、細(xì)胞或血液中提取的，由于受原料來源限制，價(jià)價(jià)十分昂貴，而且產(chǎn)量低，臨床供應(yīng)明顯不足．自70年代遺傳工程發(fā)展起來以后，人們逐步地在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了相應(yīng)的目的基因，使之與質(zhì)粒形成重組DNA，并以重組DNA引入大腸桿菌，最后利用這些工程菌，可以高效率地生產(chǎn)出上述各種高質(zhì)量低成本的藥品，請(qǐng)分析回答：
（1）進(jìn)行基因工程的基本操作一般要經(jīng)過的四個(gè)步驟是：獲取目的基因、構(gòu)建表達(dá)載體、導(dǎo)入受體細(xì)胞、目的基因檢測(cè)與鑒定．
（2）在基因工程中，質(zhì)粒是一種最常用的基因的運(yùn)載體，它廣泛地存在于細(xì)菌細(xì)胞中，是一種很小的環(huán)狀DNA分子．
（3）在用目的基因與質(zhì)粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（4）將含有“某激素基因”的質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞后，能在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)直接合成“某激素”，則該激素在細(xì)菌體內(nèi)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段．
（5）在將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌時(shí)，一般要用氯化鈣處理細(xì)菌，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟是：獲取目的基因、構(gòu)建表達(dá)載體、導(dǎo)入受體細(xì)胞、目的基因檢測(cè)與鑒定．
（2）在基因工程中，質(zhì)粒是一種最常用的基因的運(yùn)載體，它廣泛地存在于細(xì)菌細(xì)胞中，是一種很小的環(huán)狀DNA分子．
（3）在用目的基因與質(zhì)粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是：基因的“剪刀”--限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）和基因的“針線”--DNA連接酶．
（4）由于“某激素”的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，所以“某激素基因”在細(xì)菌體內(nèi)控制合成“某激素”的過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段．
（5）在將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌時(shí)，一般要用氯化鈣處理細(xì)菌，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性．
故答案為：
（1）構(gòu)建表達(dá)載體   目的基因檢測(cè)與鑒定 
（2）基因的運(yùn)載體      DNA
（3）限制性內(nèi)切酶   DNA連接酶   
（4）轉(zhuǎn)錄   翻譯
（5）氯化鈣  細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理，掌握基因工程的具體操作步驟及各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．