Question

【題目】將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構(gòu)建L-GFP融合基因，再將融合基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建下圖所示表達(dá)載體。圖中限制酶E1~E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同。下列敘述不正確的是（ ）

A.構(gòu)建L1-GFP融合基因需要用到E1、E2、E4三種酶

B.E1、E4雙酶切確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接

C.GFP可用于檢測受體細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)

D.將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入乳腺細(xì)胞培育乳汁中含L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊

Answer 1

【答案】D

【解析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心內(nèi)容，一個(gè)表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還有啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。根據(jù)題意，將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構(gòu)建L-GFP融合基因，其中綠色熒光蛋白（GFP）基因?qū)儆跇?biāo)記基因，用于篩選和鑒定。

A. 構(gòu)建L1-GFP融合基因需要先用內(nèi)切酶處理獲得L1基因和GFP基因，并將二者連接，故需要用到E1、E2、E4三種酶，A正確；

B. 圖中限制酶E1~E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同，E1、E4雙酶切可以有效減少載體自身連接和融合基因自身連接，保證L1-GFP融合基因與載體準(zhǔn)確連接，B正確；

C. 綠色熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)，C正確；

D. 為了獲得L1蛋白，可將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受精卵中而不是乳腺細(xì)胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊，D錯(cuò)誤。

故選D。